情緒應激對動脈粥樣硬化大鼠血清及斑塊炎癥標志物的影響.pdf

1、背景和目的：急性冠脈綜合征(acute coronary syndrome，ACS)是以不穩(wěn)定型心絞痛、急性心肌梗死或心臟性猝死為臨床表現的急性缺血綜合征?，F已證明，斑塊破裂、血小板聚集及血栓形成是急性冠脈綜合征的主要發(fā)病機制，炎癥在斑塊破裂的過程中發(fā)揮重要作用。血清中與炎癥有關的生物標志物白介素-6(interleukin-6，IL-6)、細胞間黏附分-1(Intracellar adhersion molecule-1，ICAM-1

2、)、C反應蛋白((C-reactive protein,CRP)等升高與冠脈斑塊不穩(wěn)定密切相關，已成為心血管不良事件發(fā)生的預測指標。 冠心病的基本病因為動脈粥樣硬化(atherosclerosis，AS)。有研究者報道大約40﹪的動脈粥樣硬化與心理應激密切相關。應激尤其是心理應激，不僅可以通過生活習慣或長期作用慢性地促進動脈粥樣硬化，而且還可以直接誘發(fā)心絞痛、心肌梗死的急性發(fā)作，使心肌梗死的預后惡化。Gidron等認為社會心理因

3、素如抑郁、敵意、焦慮等心理應激可通過促使炎性細胞釋放白介素1、6(interleukin-1，6；IL-1，6)，腫瘤壞死因子-a(tumornecrosis factor-alpha，TNF-α)和化學趨化因子(monocyte chemoattractant protein-1，MCP-1；interleukin-8,IL-8)誘導白細胞趨附與內皮細胞，激活斑塊內的單核細胞(巨噬細胞)，導致斑塊不穩(wěn)；炎性細胞因子和白細胞堆積，破壞血

4、管內皮細胞結構和功能，誘導血管痙攣；凝血纖溶改變和炎癥因子導致的促凝因子增加、抗凝因子(蛋白C)下降，導致血栓形成等機制導致ACS。研究發(fā)現心理應激可引起急性炎癥反應，使CRP、IL-6、ICAM-1等濃度增高，后者參與動脈粥樣硬化的細胞浸潤過程，促進冠狀動脈粥樣硬化形成，對冠心病的發(fā)病具有重要作用。然而心理應激對動脈粥樣硬化斑塊的直接影響尚不清楚，能否用炎癥因子水平反映應激者的應激程度預測其冠脈事件的風險亦不清楚。因此，闡明該問題對冠

5、心病的預防及治療具有重要意義。 本課題研究旨在在動脈粥樣硬化大鼠模型基礎上:(1) 評價慢性空瓶情緒應激(情緒應激，一種心理應激方式)對斑塊內炎癥指標ICAM-1的直接影響，探討情緒應激在ACS發(fā)病中的地位、機制。(2) 評價血液IL-6，CRP，sICAM-1與斑塊內炎癥指標ICAM-1的相關性，探討利用血液炎癥指標反映斑塊內炎癥活動的可靠性。(3) 分析不同應激狀態(tài)下炎癥指標表達水平是否不同，推測其臨床應用價值。 材

6、料與方法：健康純利Sprague-Dawley大鼠50只，體重180～220g，按體重隨機分為正常組(n=6)和動脈粥樣硬化組(n=44)，正常組給以普通飲食+一次性生理鹽水腹腔注射；動脈粥樣硬化組給以高脂飲食+一次性大劑量維生素D<,3>腹腔注射，喂養(yǎng)8周。將建立動脈粥樣硬化模型的44只動物按體重隨機分為3組：無應激組(n=10)，生理應激組(n=12)，情緒應激組(n=12)。按邵楓等的方法制作情緒應激模型。于第10周末次應激后1小

7、時采集血標本，采用放射免疫法(radioimmunoassay,RIA)和酶聯免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)測定血清IL-6、sICAM-1、CRP濃度。處死動物，取出心臟和主動脈，行病理學檢查和免疫組化檢查主動脈內ICAM-1表達情況。 結果：(1) 動脈粥樣硬化模型建立的確認。AS建立的標準為HE染色示主動脈血管內皮連續(xù)性中斷，管壁局部向管腔突出形成斑塊；內膜下鈣

8、化；中膜平滑肌增生、排列紊亂、彈力纖維斷裂、鈣化；外膜變薄。冠狀動脈平滑肌增生，鈣化。動脈粥樣硬化組有18只動物符合上述標準，對符合標準者進行了下一步研究。對照組血管各層結構基本正常。 (2) 主動脈：ICAM-1表達在動脈粥樣硬化各組切片明顯高于對照組(均P<0.01)。情緒應激組顯著高于無應激組、生理應激組(2.18±0.17 vs1.58±0.22，1.22±0.15，均P<0.001)；生理應激組顯著高于無應激組(1.5

9、8±0.22 vs 1.22±0.15，P=0.001)。 (3) 情緒應激組大鼠血清IL-6(51.80±4.60 pg/ml vs 27.60±4.19pg/ml，8.01±1.39 pg/ml，7.83±1.37 pg/ml)、slCAM-1(1.24±0.25 vs 0.85±0.09，0.62±0.17，0.57±0.11)、CRP(1.00±0.37 vs 0.90±0.29，1.01±0.22，0.71±0.13)

10、濃度較其他各組明顯升高(均P<0.05)；血清sICAM-1、IL-6、CRP水平與主動脈：ICAM-1表達之間存在正相關關系(r=0.75，r=0.87，P<0.01；r=0.59，P=0.01)。 結論：1.動物試驗顯示，情緒應激可使動脈粥樣硬化斑塊內炎癥因子ICAM-1表達升高，同時，血液IL-6、CRP、sICAM-1水平升高，提示情緒應激通過炎癥反應在動脈粥樣硬化斑塊由穩(wěn)定性向不穩(wěn)定性轉變中發(fā)揮重要作用。 2.