芪參益氣滴丸對大鼠頸動脈粥樣硬化及血漿炎癥因子的影響.pdf

1、目的:
　　 眾所周知，隨著人類社會的高速發(fā)展與進步，以動脈粥樣硬化(atherosclerosis，AS)為病理基礎的心腦血管病，尤其是冠心病的數(shù)量正急速上升，成為我國人口第一位的死亡原因。AS是一多因素、多基因引起的復雜的慢性炎癥性疾病，涉及損傷的內皮細胞與單核巨噬細胞、平滑肌細胞之間的相互作用，以及局部產生的大量細胞因子、生長因子的網絡調控，其中粘附分子、趨化因子、生長因子等在AS發(fā)生發(fā)展過程中具有重要作用。中醫(yī)學對動脈粥

2、樣硬化的研究治療已取得一定成績，中醫(yī)注重整體調節(jié)身體機能，從多途徑、多環(huán)節(jié)、多靶點全面干預動脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展，在治療動脈粥樣硬化，穩(wěn)定斑塊方面具有潛在的療效優(yōu)勢。芪參益氣滴丸是天士力集團研制的治療心血管疾病的現(xiàn)代中藥，具有益氣活血、通絡止痛的功效，在冠心病防治中療效肯定。但芪參益氣滴丸的抗動脈粥樣硬化作用及機制尚不清楚。本研究旨在通過動物實驗的方法來探索其對高脂血癥及球囊損傷后大鼠血管的影響，并與他汀類調脂藥物比較對動脈粥樣硬化血

3、管保護及血漿炎癥因子的影響。
　　 方法:
　　 1.頸動脈粥樣硬化模型的建立:健康雄性SD大鼠70只，常規(guī)取血后7只喂以普通飼料為對照組（Control組），63只連續(xù)飼養(yǎng)高脂飼料。16周末進行球囊損傷實驗，恢復1周后將模型動物分為四組，依次為球囊損傷芪參益氣滴丸組(Model+Q)、球囊損傷氟伐他汀組(Model+F)、球囊損傷模型組(Model)及球囊假損傷對照組(Sham)。球囊損傷組予以單側頸動脈球囊損傷，球囊

4、假損傷對照組，省去球囊導管插入，余操作同球囊損傷模型組。
　　 2.給藥:芪參益氣滴丸給藥劑量為200mg/kg，氟伐他汀組給藥劑量為5.5mg/kg，采用灌胃法進行，給藥體積1ml/100g，每日1次;球囊損傷模型組、球囊假損傷組及普通對照組，采用灌胃法灌服同體積蒸餾水。
　　 3.血清學檢測:分別于實驗開始、16周術及25周末采血作血液生化檢查。采用酶法測定TG、TC、LDL-C、HDL-C水平。于25周末采血，應用

5、酶聯(lián)免疫吸附法檢測TNF-α、IL-6和VCAM-1的水平。
　　 4.組織學:留取頸動脈組織標本，置于4％多聚甲醛溶液固定，脫水，常規(guī)石蠟包埋，間斷均勻切片，HE染色，光學顯微鏡下觀察各組頸動脈組織的形態(tài)學改變。免疫組織化學染色觀察炎癥因子表達。透射電鏡觀察頸動脈內皮細胞超微結構的改變。
　　 結果:
　　 1.血清學檢測
　　 ①血脂檢測:基礎狀態(tài)實驗大鼠血脂比較均無明顯差異（P＞0.05）。16周后

6、高脂飼料大鼠TC、TG、LDL-C高于對照組（P＜0.05），高脂飼料大鼠組間TG、TC、LDL-C水平比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。25周末，與Model、Sham組相比，Model+Q組和Model+F組TC、LDL-C水平均降低(P＜0.05)，其中Model+F組TC下降更為明顯（P＜0.05）。與Model、Sham組相比，Model+Q組的TG水平降低(P＜0.05)，Model+F組TG水平無明顯降低（P＞0.05

7、）。
　　 ②血清炎癥因子檢測:25周末與Model組相比，Model+F和Model+Q組TNF-α、VCAM-1、IL-6水平降低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。Model+Q、Model+F兩組比較TNF-α、VCAM-1水平差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）;Model+F組IL-6水平均值較低，與Model+Q組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　 2.組織學:①HE染色可見Control組大鼠頸動脈

8、血管壁內膜、中膜、外膜三層結構明顯，內膜完整、無增厚，內皮下無脂質沉積，中膜平滑肌細長呈梭形，細胞核藍染，同心圓狀排列整齊;Model組動脈壁內膜明顯增厚，內皮下可見泡沫細胞聚集，中膜平滑肌細胞排列紊亂，單位面積細胞核數(shù)量增多;MF、MQ內膜增厚較模型組輕。②免疫組化Control組未見TNF-α、VCAM-1表達。Model組可見增生的內膜內TNF-α、VCAM-1大量表達。Model+F、Model+Q組可見少量表達，Sham組亦可

9、見少量表達。③電鏡可見對照組超微結構清晰，血管腔充盈，血管內皮細胞基膜薄、光滑完整，內皮下層結締組織清晰，內膜層未見脂滴沉積，中膜平滑肌細胞呈紡錘形，密斑密體排列規(guī)則，肌絲含量豐富，線粒體、內質網無腫脹;模型組可見細胞超微結構變化最為嚴重，主要表現(xiàn)為血管平滑肌細胞向內膜遷移，核固縮，肌絲減少，線粒體明顯腫脹，呈空泡狀;芪參益氣滴丸和氟伐他汀處理組，中膜平滑肌細胞形態(tài)均有不同程度的改善，與模型組相比，線粒體腫脹減輕，密斑密體可見，肌絲含量

10、增加，恢復收縮型細胞特征。假手術組部分細胞超微結構處于紊亂狀態(tài)。
　　 結論:
　　 (1)應用內皮機械損傷加高脂飼養(yǎng)的方法可建立與人類AS病變特征相似的動物動脈粥樣硬化斑塊模型，并具有造模時間短、適于觀察藥物療效的特點。
　　 (2)本實驗中芪參益氣滴丸和氟伐他汀均可降低TC、LDL-c水平從而抑制AS進展。其中芪參益氣滴丸降低TC作用弱于氟伐他汀，但是同時還具有降低TG作用，二者合用可達到更好的調脂效果。