蓖麻RcNHX1基因的功能分析.pdf

1、雞毒支原體的分離鑒定及基因免疫的研究蓖麻RcNHX1基因的功能分析FunctionalAnalysisofRcNHX1GeneinCast(RicinuscommunisL.)申請人：馮紫洲學科專業(yè)：作物學研究方向：作物生物技術學位類別：學術學位指導教師：陳永勝教授張繼星教授論文提交日期：二○一七年六月碩士學位論文分類號035.3ICS學校代碼10136學號201400002摘要土壤鹽堿化一直是亟待解決的世界性農業(yè)難題之一，嚴重影響了全

2、球農業(yè)經濟的發(fā)展及生態(tài)環(huán)境的保護。利用基因工程選育耐鹽作物品種，已成為利用和改良鹽堿地的一條經濟有效途徑。近年來，隨著蓖麻產業(yè)的發(fā)展，人們對蓖麻的生產和加工的重視程度越來越高，而針對蓖麻耐鹽相關基因的發(fā)掘和利用的研究較少。為了挖掘耐鹽相關基因，本研究以當地主推的骨干自交系通蓖5號為材料，利用RACEPCR的方法成功克隆了蓖麻液泡膜NaH逆向轉運蛋白(vacuolarNaHantipterNHX)基因RcNHX1。RcNHX1基因包括一個

3、完整的開放閱讀框，推測編碼544個氨基酸。亞細胞定位試驗表明RcNHX1融合蛋白主要積累于細胞膜與液泡膜。以蓖麻子葉節(jié)為外植體，構建植物過表達載體、干擾載體，利用農桿菌進行遺傳轉化。PCR和Southernblot檢測表明共獲得2個穩(wěn)定遺傳的過表達株系。對過表達RcNHX1轉基因蓖麻在苗期抗鹽表型鑒定發(fā)現：150mmolLNaCl處理14d后，轉基因植株的株高和干重均顯著高于野生型。鹽脅迫后，轉基因植株脯氨酸的含量顯著高于野生型，而丙二