DTWD1的腫瘤抑制作用及其相關(guān)機(jī)制的研究.pdf

1、背景:胃癌是最常見的惡性腫瘤之一，也是全球范圍內(nèi)死亡率第二位的惡性腫瘤，對(duì)人類健康造成了嚴(yán)重的威脅。近年來(lái)，表觀遺傳調(diào)控在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中的作用已引起廣泛的關(guān)注，已有研究揭示DTWD1在胃癌中可能發(fā)揮腫瘤抑制作用，p53是其轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，而它的表達(dá)受到HDAC3的抑制，但是揭示DTWD1在胃癌發(fā)揮腫瘤抑制作用的證據(jù)尚不充分，而且其在胃癌的作用機(jī)制仍不清楚。
　　目的:目前本實(shí)驗(yàn)室前期實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)DTWD1受到p53的轉(zhuǎn)錄調(diào)控，且它

2、的表達(dá)受到HDAC3的抑制，但是DTWD1具體作用機(jī)制和生物學(xué)功能尚未得到充分確定。我們希望通過(guò)一系列體內(nèi)體外實(shí)驗(yàn)來(lái)明確DTWD1基因的生物學(xué)功能及其抑制腫瘤發(fā)生發(fā)展的的調(diào)控機(jī)制。本研究中將進(jìn)一步證實(shí)DTWD1是一個(gè)在胃癌發(fā)生發(fā)展過(guò)程中新的腫瘤相關(guān)抑制因子;探究DTWD1通過(guò)何種機(jī)制發(fā)揮其抑制腫瘤的作用。
　　方法:首先我們構(gòu)建Doxcycline(DOX)誘導(dǎo)DTWD1穩(wěn)定表達(dá)的細(xì)胞株，用人工計(jì)數(shù)做生長(zhǎng)曲線的方法，觀察外源性DT

3、WD1對(duì)細(xì)胞表型的影響，再建立裸鼠成瘤模型進(jìn)一步驗(yàn)證體內(nèi)DTWD1對(duì)腫瘤生長(zhǎng)的影響。運(yùn)用Western Blot，流式細(xì)胞儀測(cè)周期及凋亡，免疫組化，衰老檢測(cè)等方法闡明DTWD1抑制腫瘤發(fā)生發(fā)展的機(jī)制。
　　結(jié)果:本研究中進(jìn)一步證實(shí)DTWD1在胃癌中發(fā)揮腫瘤抑制因子的作用，DTWD1通過(guò)使細(xì)胞阻滯在細(xì)胞周期的G2/M期發(fā)揮其生物學(xué)功能。體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)均證實(shí)DTWD1能有效抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。在本研究中DTWD1對(duì)胃癌細(xì)胞的凋亡，衰老以及