非小細胞肺癌中TAMs的狀態(tài)及TNF-α與EGFR的表達.pdf

1、目的:
　　隨著世界范圍內(nèi)癌癥人數(shù)的增加,肺癌(Lung cancer)在我國已經(jīng)躍升為致死率最高的惡性腫瘤之一[1],是人類因癌癥而死亡的首要病因。據(jù)統(tǒng)計,近年來,在我國大城市中,因非小細胞肺癌(Non-small-cell carcinoma,NSCLC)而死亡的人數(shù)占惡性腫瘤之首。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的肺癌的發(fā)病機制有許多,例如腫瘤因子的基因突變、炎性介質(zhì)的釋放和誘導(dǎo)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等。炎癥反應(yīng)被看作是機體自我防御的過程,而一旦機體長期處

2、于慢性炎癥的狀態(tài),那么就會大大增加發(fā)生惡性腫瘤的概率。隨著分子生物學(xué)的興起,近年來,炎性介質(zhì)與腫瘤因子之間的關(guān)系成為人們的研究熱點。與腫瘤有關(guān)的炎性介質(zhì)有很多,目前已成為研究熱點的主要包括:腫瘤相關(guān)巨噬細胞(tumor associated macrophages,TAMs)、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)、腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)以及白細胞介素家族等。當(dāng)外周

3、血的單核細胞為防衛(wèi)機體不被腫瘤侵犯時,它會對腫瘤細胞進行浸潤,TAMs隨之演變而成。TAMs可以釋放多種炎性因子,如白細胞介素-10(interleukin-10,IL-10)、轉(zhuǎn)化生長因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)以及TNF-α等。在機體內(nèi)的細胞免疫和腫瘤免疫應(yīng)答中,活化的T細胞和巨噬細胞產(chǎn)生了TNF-α。TNF-α對腫瘤起著雙刃劍的作用,高濃度的TNF-α與干擾素協(xié)同作用可增強活化巨

4、噬細胞的效應(yīng),起著殺傷腫瘤細胞的作用,而低濃度的TNF-α可促使腫瘤生長與侵襲。近年來,隨著人們的研究進展,新興的腫瘤因子被陸續(xù)發(fā)現(xiàn),如表皮生長因子(epidermal growth factor,EGFR)、血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、單鏈小型RNA(micro RNA,miRNA)和B淋巴瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,BCL-2)等。EGFR高

5、表達于目前已知的許多惡性腫瘤中,在人體內(nèi),該因子普遍表達于表皮和基質(zhì)細胞,其所介導(dǎo)的信號通路包括腫瘤細胞增殖、遷移、細胞分化和內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定等,由此不難得出,該因子在細胞的再生和腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中起到了重要作用。研究表明,約有3/4的肺癌患者,其癌組織高度表達EGFR,患者出現(xiàn)轉(zhuǎn)移早、易復(fù)發(fā)等現(xiàn)象可能與EGFR高表達有關(guān)。EGFR酪氨酸激酶抑制劑（EGFR-Tyrosine Kinase Inhibitors,EGFR-TKI)聯(lián)合化療治

6、療晚期NSCLC患者的方法目前已經(jīng)被廣泛應(yīng)用,據(jù)報導(dǎo),約23％的晚期NSCLC病人在中斷EGFR-TKI藥物后會迅速復(fù)發(fā)[2]。M1型TAMs可分泌白細胞介素、趨化因子和TNF-α。有實驗證實,炎性細胞被激活后,可釋放大量的活性氧,從而導(dǎo)致癌變[3]。Cardoso AP[4]等通過建立小鼠模型,使結(jié)腸癌小鼠微環(huán)境中產(chǎn)生的EGF具有一定的侵襲性和能動性,去除了EGF的免疫功能后,由巨噬細胞調(diào)節(jié)的癌細胞的侵襲性下降。TAMs、TNF-α、

7、EGFR在許多腫瘤中的研究已經(jīng)非常廣泛,而對于三者的聯(lián)合檢測國內(nèi)目前研究甚少。本實驗主要側(cè)重研究炎癥介質(zhì)與腫瘤因子之間的關(guān)系,并且探討它們之間的生物學(xué)行為,從而推測腫瘤的發(fā)生可能是某些炎癥介質(zhì)與腫瘤因子共同作用的結(jié)果,從而為以炎癥介質(zhì)為核心的腫瘤研究提供依據(jù)。
　　方法:
　　實驗組:于術(shù)中取50例NSCLC患者的肺組織標(biāo)本,進行石蠟包埋;對照組:選取距腫瘤3～5cm的組織39例。采用免疫組織化學(xué)SABC法檢測TAMs在非小

8、細胞肺癌組織和癌旁肺組織中的狀態(tài)和TNF-α、EGFR在非小細胞肺癌組織和癌旁肺組織中的表達情況。利用SPSS17.0軟件對數(shù)據(jù)進行分析,并采用χ2檢驗、Spearman秩相關(guān)檢驗作統(tǒng)計分析。
　　結(jié)果:
　　1.TAMs在實驗中的檢測結(jié)果:TAMs在NSCLC癌組織、癌旁肺組織中的陽性率分別為56.0%(28/50)和28.2%(11/39),兩組之間差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。TAMs在NSCLC癌組織中的表達與

9、病理類型、分化程度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān)。
　　2.TNF-α在實驗中的檢測結(jié)果:TNF-α在NSCLC癌組織、癌旁肺組織中的陽性率分別為60.0%(30/50)和33.3%(13/39),兩組之間差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。TNF-α在NSCLC癌組織中的表達與病理類型、分化程度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān)。
　　3.EGFR在實驗中的檢測結(jié)果:EGFR在NSCLC癌組織、癌旁肺組織中的陽性率分別為70.0%(35/50)和33.3

10、%(13/39),兩組之間差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。EGFR在高中分化、低分化組的陽性表達率分別為41.2%(14/34)、87.5%(14/16)),差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。EGFR在有、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的NSCLC癌組織中的陽性表達率分別為74.1%(20/27)、43.5%(10/23),兩組間的差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。EGFR在NSCLC組織中的表達與病理類型無關(guān)。
　　4.在 NSCLC癌

11、組織中,TNF-α與 EGFR的表達呈正相關(guān)(r=0.356,P=0.011)。
　　結(jié)論:
　　通過采用SABC法,檢測在NSCLC癌組織和癌旁肺組織中TAMs的狀態(tài)和TNF-α、EGFR的表達情況,本實驗表明:
　　1.在NSCLC癌組織中,TAMs呈高表達,但是其表達與NSCLC的病理類型、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān)。
　　2.在NSCLC癌組織中,TNF-α呈高表達,它可促進NSCLC的浸潤與增值。