高耐藥背景下幽門螺桿菌藥敏檢測(cè)指導(dǎo)意義臨床研究.pdf

1、目的：
　　分析比較溫州市鄉(xiāng)村地域和城鎮(zhèn)地域幽門螺桿菌(Helicobacter pylori，Hp)對(duì)6種常用抗生素的耐藥情況，探討Hp藥物敏感性試驗(yàn)在Hp臨床根除治療上的指導(dǎo)意義。
　　方法：
　　1.實(shí)驗(yàn)對(duì)象及標(biāo)本采集:實(shí)驗(yàn)對(duì)象為溫州地區(qū)自2012年4月至2013年5月因上消化道癥狀來我院接受胃鏡檢查，且經(jīng)13C/14C呼氣試驗(yàn)檢查為陽性以及胃鏡下胃黏膜標(biāo)本Hp培養(yǎng)為陽性患者300例，其中男性為181例，女性為1

2、19例，年齡范圍為18-70歲。在胃鏡檢查時(shí)采集胃竇小彎側(cè)距幽門5cm內(nèi)，黏膜深部活檢組織一塊，置于Hp轉(zhuǎn)運(yùn)管培養(yǎng)基，用于Hp培養(yǎng)。排除標(biāo)準(zhǔn)為:(1)年齡小于18歲或大于70歲;(2)近1個(gè)月內(nèi)有抗生素、鉍劑、H2受體拮抗劑及PPI的用藥史;(3)酗酒;(4)長(zhǎng)期服用非甾體類抗炎藥;(5)已知的對(duì)治療方案中任一種藥物過敏;(6)存在上消化道出血、穿孔、梗阻或腫瘤等并發(fā)癥患者;(7)有上消化道手術(shù)史;(8)妊娠期及哺乳期婦女;(9)不能或

3、不愿簽署知情同意書。
　　2.Hp分離培養(yǎng)及菌株鑒定:300例患者的胃黏膜組織經(jīng)充分研磨后，接種于哥倫比亞血瓊脂平板（含5％脫纖維綿羊血及選擇性抗生素），置于37℃微需氧環(huán)境下(5％02;10％ CO2;85％ N2)培養(yǎng)72小時(shí)，挑取可疑菌落（針尖樣半透明狀菌落，扁平，圓形），經(jīng)革蘭染色并在高倍顯微鏡下鏡檢為螺旋形、S形或弧形陰性桿菌，同時(shí)伴尿素酶、過氧化氫酶、氧化酶試驗(yàn)陽性，才鑒定為Hp菌株，保存在培養(yǎng)基內(nèi)置于上訴環(huán)境中備用。

4、
　　3.藥敏鑒定:按照CLSI(Clinical and Laboratory Standards Institute，美國(guó)實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì))推薦方法，采用耐藥臨界點(diǎn)藥物瓊脂稀釋法。將抗生素溶液加入瓊脂中稀釋成相應(yīng)臨界點(diǎn)濃度，傾注平板冷卻，接種菌懸液，置于上述培養(yǎng)環(huán)境下72h，若接種點(diǎn)有菌群生長(zhǎng)則判讀該菌株為耐藥，以NCTC11637標(biāo)準(zhǔn)菌株作質(zhì)控菌對(duì)照。根據(jù)既往研究，將Hp對(duì)抗生素的最小抑菌濃度值(MIC)定為:甲硝唑(Met

5、)8μg/ml，阿莫西林(Amo)2μg/ml，克拉霉素(Cla)1μg/ml，慶大霉素(Gen)16μg/ml，呋喃唑酮(Fur)2μg/ml，左氧氟沙星(Lev)2μg/ml。若對(duì)兩種以上抗生素均耐藥，則該菌株被判定為多重耐藥菌株(multidrug-resistantbacteria，MRB)。
　　4.治療方案:對(duì)符合入選條件的300例患者隨機(jī)分為A、B兩組，各150例:A組（實(shí)驗(yàn)組）根據(jù)Hp藥敏結(jié)果采用敏感抗生素組成的三

6、聯(lián)方案治療;B組（對(duì)照組）隨機(jī)選用阿莫西林、克拉霉素、甲硝唑及左氧氟沙星中的兩種抗生素組成三聯(lián)方案。PPI均使用奧美拉唑，用藥劑量分別規(guī)定為:奧美拉唑20mg bid、克拉霉素500mg bid、阿莫西林1000mg bid、甲硝唑400mg bid、左氧氟沙星200mgbid?？笻p療程均為1周，潰瘍病患者再繼續(xù)服用奧美拉唑20mg qd，療程3-7周。所有患者在停用PPI至少4周后復(fù)查13C/14C呼氣試驗(yàn)，結(jié)果陰性者判定為根除成功

7、，陽性者判定為根除失敗。
　　5.使用SPSS(17.0)統(tǒng)計(jì)軟件處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。對(duì)兩組年齡進(jìn)行正態(tài)檢驗(yàn)，對(duì)Hp根除結(jié)果的比較采用卡方檢驗(yàn)或Fisher's精確概率法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1.Hp對(duì)克拉霉素、甲硝唑、左氧氟沙星的總耐藥率分別為23.3％、97.3％和26.7％，鄉(xiāng)村和城鎮(zhèn)患者的Hp菌株對(duì)克拉霉素、甲硝唑及左氧氟沙星耐藥率分別為23.8％vs.22.7％、98.8％

8、 vs.95.5％和26.8％ vs.26.5％。300例Hp菌株中未發(fā)現(xiàn)有對(duì)阿莫西林、慶大霉素及呋喃唑酮耐藥的菌株。共有120株對(duì)兩種或以上的抗生素耐藥，被判定為MRB。
　　2.A組共有142例完成隨訪，其中120例患者成功根除Hp;B組共有136例完成隨訪，其中76例患者成功根除Hp。Hp根除率在意向性分析(ITT)和符合方案分析(PP)中分別為:A組，80.0％、84.5％;B組，50.7％、55.9％。
　　結(jié)論：