蘭州地區(qū)幽門螺桿菌臨床分離株耐藥狀況及基因分型研究.pdf

1、目的：
　　 1.調(diào)查蘭州地區(qū)上消化道疾病患者中分離幽門螺桿菌(Helicobacter pylori，Hp)對(duì)五種常用抗菌藥物(阿莫西林、克拉霉素、甲硝唑、左氧氟沙星、呋喃唑酮)的耐藥狀況及其與疾病的關(guān)系，為臨床治療提供依據(jù)。
　　 2.調(diào)查蘭州地區(qū)流行Hp菌株的空泡毒素(Vaculating cytotoxin A)基因(vacA)、細(xì)胞毒素相關(guān)基因蛋白(Cytotoxin associating gene prot

2、ein)基因(cagA)、及唾液酸粘附素(Sialic acid binding adhesion)基因(sabA)的基因型別，分析蘭州地區(qū)流行Hp的基因多樣性以及與上消化道疾病的關(guān)系，補(bǔ)充國(guó)內(nèi)關(guān)于Hp sabA的研究工作；為探尋當(dāng)?shù)厣舷兰膊「甙l(fā)原因以及開發(fā)疫苗提供理論支持。
　　 方法：
　　 1.收集患者胃粘膜標(biāo)本197份，臨床病理學(xué)診斷病例類型；采用微需氧培養(yǎng)技術(shù)結(jié)合革蘭染色、尿素酶試驗(yàn)和氧化酶試驗(yàn)分離培養(yǎng)和鑒

3、別Hp；采用Kirby-Bauer紙片法檢測(cè)Hp對(duì)阿莫西林、克拉霉素、甲硝唑、呋喃唑酮和左氧氟沙星的耐藥狀況；分析比較不同性別、年齡和疾病類型中分離Hp對(duì)五種抗菌藥物的耐藥情況。
　　 2.從分離培養(yǎng)的80株Hp菌株中提取DNA。設(shè)計(jì)vacA的s1a,s1b,s1c,m1,m2引物,cagA和sabA引物，PCR檢測(cè)蘭州地區(qū)Hp分離菌株的vacA,cagA,sabA毒力基因型別。比較不同疾病中Hp的毒力基因以及不同vacA型別與

4、疾病發(fā)生的關(guān)系。
　　 結(jié)果：
　　 1.從197例上消化道疾病患者中分離出81株Hp，陽性率41.12％，不同性別與年齡患者間Hp的分離陽性率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；消化性潰瘍患者中Hp的分離培養(yǎng)陽性率(56.25％)顯著高于胃炎患者(P＜0.05)。Hp對(duì)阿莫西林、克拉霉素、甲硝唑、呋喃唑酮和左氧氟沙星的耐藥率依次為3.70％，7.41％，67.90％，3.70％和6.17％。Hp耐藥性在不同性別、年齡段、

5、疾病類型間無顯著性差異(P＞0.05)。
　　 2.80株Hp vacA均陽性，主要以s1a+s1c陽性菌株(78.8％)為主，其次為s1a(11.3％)和s1c(7.5％)，s1b陽性率極低。m區(qū)主要以m2為主(82.5％)，m1陽性菌株僅占2.5％，另有12株m區(qū)為陰性。cagA陽性率為95.0％(76/80)，sabA陽性率為66.3％(53/80)。vacA、cagA在不同類型疾病中的陽性率無顯著差異(P＞0.05)；

6、sabA在消化性潰瘍疾病中的陽性率(79.5％)顯著高于胃炎(50％)(P＜0.05)。不同型別的vacA在疾病中的陽性率無顯著差異(P＞0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1.蘭州地區(qū)消化性潰瘍患者Hp的分離培養(yǎng)陽性率顯著高于胃炎患者，提示Hp在當(dāng)?shù)叵詽儼l(fā)生中的作用更為重要。
　　 2.蘭州地區(qū)分離Hp菌株對(duì)甲硝唑耐藥率高，不應(yīng)該作為治療Hp的一線藥物。對(duì)呋喃唑酮、阿莫西林等耐藥率較低，應(yīng)作為根除Hp的主要

7、藥物。已經(jīng)有多重耐藥菌株出現(xiàn)。
　　 3.蘭州地區(qū)分離Hp菌株主要為vacA和cagA雙陽性的Ⅰ型菌株，致病性強(qiáng)。不同的vacA和cagA型別與疾病的病理類型無關(guān)。
　　 4.蘭州地區(qū)人群感染Hp菌株中s1a和s1c雙陽性率高，可能與細(xì)菌基因變異或胃內(nèi)混合感染有關(guān)。這是否與當(dāng)?shù)厣舷兰膊「甙l(fā)存在相關(guān)性，值得深入探討。
　　 5.蘭州地區(qū)人群感染Hp菌株中存在sabA，且在消化性潰瘍患者中明顯高于胃炎。其在疾病發(fā)