浙江地區(qū)幽門螺桿菌臨床分離株中cagA、vacA、iceA基因的分布及分析.pdf

1、該研究的目的是研究浙江地區(qū)幽門螺桿菌臨床分離株中cagA、vacA、iceA各基因的存在情況并分析各基因與胃十二指腸疾病的關(guān)系.材料和方法:共從浙江地區(qū)116例胃十二指腸疾病患者的胃黏膜活檢組織中分離培養(yǎng)出Hp.其中浙醫(yī)二院49例,岱山縣人民醫(yī)院67例.116例患者中慢性淺表性胃炎31例,慢性萎縮性31例,糜爛性胃炎18例,消化性潰瘍30例,胃癌6例.將胃十二指腸疾病患者的胃黏膜活檢組織研磨后涂布于ECY選擇性培養(yǎng)基上,37℃,微需氧(

2、5﹪O<,2>、10﹪CO<,2>和85﹪N<,2>)環(huán)境中培養(yǎng)5天后,經(jīng)系統(tǒng)鑒定(菌落特征、快速尿素酶實(shí)驗(yàn)、氧化酶實(shí)驗(yàn)、形態(tài)及染色特性)確認(rèn)為Hp者,進(jìn)一步傳代培養(yǎng)2天擴(kuò)增細(xì)菌.用標(biāo)準(zhǔn)酚/氯仿抽提法提取Hp的基因組DNA,根據(jù)文獻(xiàn)報道的引物,進(jìn)PCR擴(kuò)增(95℃預(yù)變性3min后,94℃變性45s,54℃退火45s,72℃延伸45s,共30個循環(huán),再于72℃延伸7min),用瓊脂糖凝膠電泳法將PCR產(chǎn)物進(jìn)行電泳以檢測Hp臨床分離株的ca