B族維生素免疫分析方法的建立.pdf

1、維生素對(duì)人體有著非常重要的意義，維持體內(nèi)多種生化反應(yīng)的正常進(jìn)行。由于多數(shù)維生素?zé)o法由機(jī)體自身合成，需定時(shí)從膳食中攝取，當(dāng)發(fā)生病變或飲食不均衡時(shí)，很容易導(dǎo)致維生素缺乏，導(dǎo)致更多疾病的發(fā)生;同時(shí)，過(guò)量補(bǔ)充維生素也會(huì)對(duì)人體造成傷害。隨著人們生活質(zhì)量的提高，市面上的維生素強(qiáng)化食品和保健品越來(lái)越多，品種繁雜，相關(guān)的質(zhì)量監(jiān)管也越來(lái)越重要。
　　維生素現(xiàn)有的檢測(cè)方法主要集中在傳統(tǒng)的微生物法和高效液相色譜法等儀器分析方法。微生物法耗時(shí)長(zhǎng)，操作繁瑣

2、;高效液相色譜法不適合于高通量篩選和現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)。因此，免疫分析法以其快速、靈敏、專一等特點(diǎn)，成為維生素檢測(cè)方法的極大補(bǔ)充。
　　本實(shí)驗(yàn)建立了針對(duì)維生素B2、維生素B7和維生素B12的免疫分析方法。
　　通過(guò)CDI法合成了維生素B2的免疫原并得到了多克隆抗體。酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)的檢測(cè)靈敏度達(dá)到6.73 ng/mL，線性范圍為1-80 ng/mL，方法與高效液相色譜法和紫外分光光度法一致性良好。
　　通過(guò)氨基化的異

3、硫氰酸熒光素與維生素B7成功合成了熒光示蹤物，并建立起了針對(duì)維生素B7的熒光偏振免疫分析法(FPIA)。考察了不同熒光示蹤物對(duì)檢測(cè)的影響，得到了最佳檢測(cè)條件下，靈敏度為450.30 ng/mL，線性范圍為50-10000 ng/mL。
　　通過(guò)酸水解加CDI法，合成了維生素B12免疫原并得到了多克隆抗體，在ELISA的基礎(chǔ)上建立了化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法(CLEIA)，檢測(cè)靈敏度提高到0.92μg/mL，優(yōu)于同條件下的ELISA法。<