Hhcy致大鼠腦血管損傷及B族維生素干預(yù)的研究.pdf

1、目的：探討高同型半胱氨酸血癥(Hyperhomocysteinemia,Hhcy)大鼠腦血管結(jié)構(gòu)和功能的改變及補(bǔ)充B族維生素后的干預(yù)效果。 方法：采用SD大鼠40只隨機(jī)分為4組：正常對照組、Hhcy模型組、治療給藥組、預(yù)防給藥組，每組10只。分別給予普通飼料、高蛋氨酸飼料、高蛋氨酸飼料喂養(yǎng)4周加用B族維生素8周、高蛋氨酸飼料喂養(yǎng)的同時(shí)給予B族維生素。實(shí)驗(yàn)進(jìn)行共12周，測定血漿總同型半胱氨酸(total homocysteine，

2、tHcy)濃度，血清及腦組織勻漿丙二醛(malonaldehyde，MDA)、一氧化氮(nitric oxide,NO)水平、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)活力，電鏡觀察腦血管組織學(xué)改變。 結(jié)果： 1．大鼠喂以高蛋氨酸飼料4周可完全誘導(dǎo)Hhcy，Hhcy模型組大鼠血漿tHey水平由實(shí)驗(yàn)開始時(shí)的13.19±3.10μmol/l上升至實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)的20.76±5.49μmol/l；治療給藥組

3、在第4周高同型半胱氨酸血癥(21.01±6.55μmol/l)造模成功后給予B族維生素干預(yù)8周，第12周血漿tHey水平為10.28±5.05μmol/l，與同時(shí)期正常組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(13.27±3.63μmol/l，P>0.05)；預(yù)防給藥組在第4周時(shí)血漿tHey水平(16.40±4.15lμmol/l)明顯低于同時(shí)期造模組(22.85±4.92μmol/l)，至第12周時(shí)血漿tHcy水平(10.20±2.25μmol/l)與

4、正常組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(13.27±3.63μmol/l，P>0.05)。 2．第4周與第12周Hhcy模型組血清MDA水平(13.80±3.86nmol/l，13.47±3.34nmol/ml)顯著高于正常對照組(7.81±2.61nmol/ml，7.03±1.58 nmol/ml，P<0.01)，治療給藥組第12周血清MDA水平(6.82±1.51nmol/ml)低于第4周(13.11±2.70nmol/ml，P<0.0

5、1)，并且與同時(shí)期正常對照組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(7.03±1.58nmol/ml，P>0.05)；預(yù)防給藥組第4周血清MDA水平(10.35±2.74nmol/ml)低于Hhcy模型組(13.80±3.86nmol/ml，P<0.05)，第12周血清MDA水平(7.85±1.79nmol/ml)較同時(shí)期正常組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(7.03±1.58nmol/ml，P>0.05)。 3．第4周與第12周Hhcy模型組血清SOD活力(

6、123.70±22.30U/ml，124.37±22.06 U/ml)低于正常對照組(153.57±23.71 U/ml，151.21±5.27 U/ml．P<0.01)；治療給藥組第12周血清SOD活力(160.21±17.01U/ml)高于第4周(134.66±20.06U/ml，P<0.05)，與同時(shí)期正常對照組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(151.21±5.27U/ml，P>0.05)；預(yù)防給藥組第4周血清SOD活力(147.15±16

7、.54 U/ml)高于Hhcy模型組(123.70±22.30 U/ml，P<0.05)，第4周(147.15±16.54 U/ml)及第12周血清SOD活力(156.46±13.91U/ml)與同時(shí)期正常組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(153.57±23.71 U/ml，151.21±5.27 U/ml，P>0.05)。 4．第4周與第12周Hhcy模型組血清NO含量(14.26±4.64μmol/l，12.90±5.44μmol/l

8、)低于正常對照組(26.40±8.27μmol/l，28.53±7.42μmol/l，P<0.01)；治療給藥組第12周血清NO含量(21.77±5.85μmol/l)高于本組第4周(14.84±6.75μmol/l，P<0.05)及Hhcy模型組第12周(12.90±5.44μmol/l，P<0.05)水平，但仍低于同時(shí)期正常對照組(28.53±7.42gmol/l，P<0.05)；預(yù)防給藥組第4周血清NO含量(17.62±8.58μ

9、mol/l)高于Hhcy模型組(14.26±4.64μmol/l，P<0.05)，第12周血清NO含量(26.80±8.31μmol/l)與同時(shí)期正常組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(28.53±7.42μmol/l，P>0.05)。 5．第12周大鼠腦組織勻漿Hhcy模型組MDA含量(2.10±0.43 nmol/mgprot)高于正常對照組(1.66±0.32 nmol/mgprot,P<0.01)、治療給藥組(1.70±0.31nm

10、ol/mgprot,P<0.05)及預(yù)防給藥組(1.65±0.24 nmol/mgprot，P<0.01)，治療給藥組，預(yù)防給藥組MDA含量與正常對照組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；Hhcy模型組SOD活力(36.07±13.81U/mgprot)低于正常對照組(50.87±13.51U/mgprot，P<0.05)、治療給藥組(55.78±13.51U/mgprot，P<0.01)及預(yù)防給藥組(49.19±13.88U/mgpro

11、t，P<0.05)，治療給藥組，預(yù)防給藥組SOD活力與正常對照組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；Hhcy模型組(6.91±2.91μmol/gprot)及治療給藥組(10.86±5.21μmol/gprot)腦組織勻漿NO含量低于正常對照組(16.33±6.00μmol/gprot,P<0.05)，預(yù)防給藥組NO含量(16.04±6.84μmol/gprot)與正常對照組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 6．Hhcy模型

12、組大鼠電鏡觀察大腦中動(dòng)脈可見內(nèi)皮細(xì)胞變性，內(nèi)皮細(xì)胞膜溶解，模糊不清，電子密度減低，胞質(zhì)內(nèi)空泡形成，細(xì)胞器無法分辨，內(nèi)彈力膜分層，被平滑肌樣細(xì)胞分割，并呈蟲蝕樣改變，平滑肌細(xì)胞核凝集等改變，觀察大腦皮質(zhì)可見毛細(xì)血管基膜溶解，內(nèi)皮細(xì)胞核凝聚變形，腳板水腫，神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞水樣變性，胞漿水腫無細(xì)胞器，染色質(zhì)溶解丟失等損害。治療給藥組及預(yù)防給藥組損傷輕于Hhcy模型組，可見大腦中動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞質(zhì)中空泡形成，細(xì)胞膜增厚，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)細(xì)胞器結(jié)構(gòu)尚可分辨，大腦