淋病奈瑟菌外膜蛋白Ⅰ的純化及其ELISA雙抗夾心法的建立.pdf

1、華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文淋病奈瑟菌外膜蛋白Ⅰ的純化及其ELISA雙抗夾心法的建立姓名：趙曉蓉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：流行病學(xué)與衛(wèi)生統(tǒng)計(jì)學(xué)指導(dǎo)教師：葉臨湘周旺2001.5.1蘭!整墊盔蘭堡塋墨堂墮堡主蘭焦笙莖淋病奈瑟菌外膜蛋白I的純化及其ELISA雙抗夾心法的建立碩士研究生導(dǎo)師趙曉蓉葉臨湘周旺華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院流行病學(xué)教研室中文摘要(淋病奈瑟菌(淋球菌)外膜蛋白I(PI)又稱主要的外膜蛋白，約＼占淋球菌外膜蛋白總量的50％～

2、60％，是其外膜中的一個(gè)穩(wěn)定表達(dá)成分，存在于所有淋球菌菌株，并且在傳播過(guò)程中不發(fā)生改變。PI是淋球菌重要的血清學(xué)分類抗原，可分為P【A、PIB兩個(gè)亞類。豫者都具有群和型特異的抗原決定簇。協(xié)同凝集試驗(yàn)可將淋球菌分為wI、wⅡ、wⅢ三個(gè)血清群，其中WI群淋球菌株含有PIA，wⅡ甩，Ⅱ瑗￥淋球菌株含有PIB。利用針對(duì)PIA、PIB特異抗原決定簇的單克隆抗體又可將淋球菌分為不同的血清型。PI的這些特性在淋病的血清學(xué)分型和診斷方面具有重、—r一一

3、要意義，并有希望用于研制相應(yīng)疫苗。)為制備抗PI的單克隆抗體并進(jìn)一／步研制淋球菌膠體金免疫層析檢測(cè)試條，本研究分離提純了P1，用PI免疫BALBIc小鼠，制備了抗PI多克隆抗體，并聯(lián)合應(yīng)用兔抗淋球菌多克隆抗體建立了檢測(cè)PI的ELISA雙抗夾心法。愀]選用標(biāo)準(zhǔn)菌株29400(wI群淋球菌株)、29403(Wll九ⅣⅢ群淋s球菌株)分別提取PIA、PIB。首先在CaCt2存在的條件下采用陽(yáng)離子型表面活性劑CTB粗提PI，隨后離心除去CTB，