扇貝多肽對紫外線誘導(dǎo)的HaCaT細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?建立UVA和UVB同時(shí)照射HaCaT細(xì)胞的損傷模型,并在此基礎(chǔ)上研究PCF(扇貝多肽)對UVA和UVB同時(shí)誘導(dǎo)HaCaT細(xì)胞凋亡的影響.實(shí)驗(yàn)方法:實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)分為6組:正常對照組、UV組(模型組、0.1％維生素C組、0.125%PCF、0.25%PCF、0.5%PCF).在加PCF并孵育1小時(shí)后,對HaCaT細(xì)胞用紫外線A(1J/cm 2)和紫外線B(15mJ/cm 2)同時(shí)進(jìn)行照射.以MTT法評價(jià)PCF對細(xì)胞生存率的影響.酶化學(xué)

2、法檢測細(xì)胞培養(yǎng)液中的SOD(超氧化物歧化酶)、GSH-PX(谷胱甘肽過氧化物酶)、抗超氧陰離子、MDA(丙二醛)的活性和T-AOC(總抗氧化能力).通過透·射電子顯微鏡對細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察.以彗星電泳試驗(yàn)測定PCF對HaCaT細(xì)胞DNA保護(hù)作用.原位雜交實(shí)驗(yàn)檢測了PCF對p21mRNA的影響.流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞的凋亡率、線粒體膜電位和細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子濃度.結(jié)論:在國際上率先建立UVA和UVB同時(shí)損傷HaCaT細(xì)胞的凋亡模型.PCF使