凋亡相關(guān)基因PNAS-2參與細(xì)胞凋亡及白血病發(fā)生的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文凋亡相關(guān)基因PNAS2參與細(xì)胞凋亡及白血病發(fā)生的實(shí)驗(yàn)研究姓名：王海嶸申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：內(nèi)科學(xué)血液病學(xué)指導(dǎo)教師：歐陽(yáng)仁榮20070401SNF7DC2及CGI34是同一基因的別名。第二部分抑制n漁S2基因表達(dá)與細(xì)胞凋亡關(guān)系的研究構(gòu)建shRNA表達(dá)質(zhì)粒載體并轉(zhuǎn)染至U937細(xì)胞后，我們應(yīng)用流式細(xì)胞儀及激光共聚焦顯微鏡檢測(cè)了抑制PNAS2基因表達(dá)與細(xì)胞凋亡的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)抑制PNAS。2基因表達(dá)后細(xì)胞凋亡率上升。第三部

2、分PNAS2基因過(guò)量表達(dá)與細(xì)胞凋亡關(guān)系的研究通過(guò)構(gòu)建PNAS2表達(dá)質(zhì)粒載體并轉(zhuǎn)染至U937細(xì)胞后，我們應(yīng)用流式細(xì)胞儀及激光共聚焦顯微鏡檢測(cè)了抑制PNAS2基因表達(dá)與細(xì)胞凋亡的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)過(guò)量表達(dá)PNAS。2基因后細(xì)胞凋亡率下降。與RNA干擾部分結(jié)果綜合分析后我們判定PNAS2是抗細(xì)胞凋亡基因。第四部分抗體芯片檢測(cè)抑制PNAS2表達(dá)后各蛋白的變化抗體芯片結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)了抑制PNAS一2表達(dá)后確實(shí)可促進(jìn)細(xì)胞凋亡。抑制PNAS2表達(dá)后可通過(guò)兩種

3、途徑促進(jìn)細(xì)胞凋亡：通過(guò)AJF介導(dǎo)的非caspase依賴途徑及caspase依賴途徑中的GraBPefforin通路參與細(xì)胞凋亡。抑制PNAS2表達(dá)后抑癌基因產(chǎn)物蛋白如p53、Rb等均上升，而芯片中其余的抑癌蛋白無(wú)變化。提示高表達(dá)PNAS2可能通過(guò)抑制抑癌蛋白p53、Rb等參與腫瘤形成。第五部分PNAS2基因在白血病及非白血病患者中的表達(dá)單個(gè)核細(xì)胞樣本中的PNAS2基因表達(dá)在初發(fā)，未CR和復(fù)發(fā)急性白血病患者中顯著高于CR、非腫瘤及實(shí)體腫瘤