降鈣素和1,25維生素D拮抗牙周炎大鼠牙槽骨喪失的療效觀察.pdf

1、目的:本實驗通過建立大鼠牙周炎模型并對其應(yīng)用1，25維生素D及降鈣素后，觀察牙周探診深度(probing depth，PD)、牙槽骨喪失水平，檢測血清中的骨堿性磷酸酶(bone alkaline phosphatase，BALP)及骨鈣素(osteocalcin，OC)的濃度的變化情況。以探討降鈣素與1，25維生素D對牙周炎導(dǎo)致大鼠牙槽骨喪失的影響，從而為牙周炎的輔助治療探索一種新的可行方法。
　　方法:清潔級健康成年雄性Wist

2、ar大鼠125只，隨機分為A、B、C、D、E5組(n=25只/組)，即A組為空白對照組，B組為牙周炎對照組，C組為降鈣素治療組，D組為1，25維生素D治療組，E組為降鈣素和1，25維生素D聯(lián)合治療組。B、C、D、E組用正畸結(jié)扎絲結(jié)扎雙側(cè)上頜第一磨牙牙頸部加高糖軟食的方法建立牙周炎大鼠模型。A組麻醉后不作處理。用正畸結(jié)扎絲結(jié)扎上頜磨牙牙頸部加高糖軟食的方法建立牙周炎大鼠模型后，給予藥物治療，降鈣素治療組(C組，降鈣素溶于生理鹽水，2μg/

3、kg，皮下注射)、1，25維生素D治療組（D組，維生素D溶于花生油中，2μg/kg，灌胃）、降鈣素和1，25維生素D聯(lián)合治療組（E組）。觀察各組大鼠的一般指標(biāo):體質(zhì)量變化，活動情況，毛色等。在第2周、4周、6周和8周末各組處死5只大鼠，測量雙側(cè)上頜第一磨牙牙周探診深度，觀察牙槽骨喪失水平;第8周末各組采取10只大鼠腹部降主動脈血，用酶聯(lián)免疫吸附試驗法(Enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)檢測血

4、清中的骨堿性磷酸酶（Bone alkaline phosphatase，BALP）以及骨鈣素(Osteocalcin，OC)的濃度。留取大鼠上頜骨，經(jīng)10％甲醛固定后，15％的EDTA脫鈣，常規(guī)石蠟包埋切片HE染色觀察牙周組織的病理變化，包括牙周膜纖維排列和炎細(xì)胞浸潤程度以及牙槽骨情況。應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計軟件包分析實驗數(shù)據(jù)，符合正態(tài)分布和方差齊性計量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示。多組資料間均數(shù)比較采用單因素方差分析，組間多重

5、比較采用LSD-t檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果:A組大鼠活潑好動，形體均勻，反應(yīng)敏捷，每日飲量少且尿量少，毛色光滑，體質(zhì)量隨著周齡的增長而穩(wěn)步的增長。B、C、D、E組大鼠于結(jié)扎術(shù)3天后，表現(xiàn)為食欲下降，唾液量增多，生長基本良好，每日飲量少且尿量少，隨后食欲逐漸如常，體質(zhì)量隨著周齡的增長而穩(wěn)步的增長。通過對A組和B組大鼠雙側(cè)上頜第一磨牙PD的比較可以發(fā)現(xiàn)，用藥2周，B組大鼠的PD高于A組大鼠(P＜0.05)。B組

6、與C、D、E組PD差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）;用藥后4周、6周和8周，B組PD均高于C、D、E組(P＜0.05)，且E組PD低于C組和D組。通過對A組和B組大鼠雙側(cè)上頜第一磨牙牙槽骨喪失水平的比較可以發(fā)現(xiàn)，用藥2周，B組大鼠牙槽骨喪失水平高于A組(P＜0.05)。B組大鼠與C、D、E組大鼠牙槽骨喪失水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）;用藥4周時，B組與C、D、E組牙槽骨喪失水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）;用藥6周和8周時，

7、B組牙槽骨喪失水平高于C、D、E組（P＜0.05），且E組低于C組和D組;在第8周末進行血清中BALP及OC的檢測。8周時，A組BALP、OC均高于B組(P＜0.05);且B、C、D、E組間BALP和OC的水平差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。8wk時組織病理學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)差異，HE染色顯示A組牙齦上皮完整，結(jié)合上皮位于釉牙骨質(zhì)界，牙槽嵴頂無吸收。B組牙周袋形成，牙齦乳頭喪失，牙齦上皮表面糜爛，牙周膜纖維排列紊亂炎癥細(xì)胞浸潤牙槽骨吸收嚴(yán)重