來氟米特對高糖環(huán)境下足細(xì)胞NF-κB和MMP-9表達(dá)的影響.pdf

1、目的：
　　1、構(gòu)建高糖人足細(xì)胞模型，通過在不同時點(diǎn)檢測足細(xì)胞特征蛋白Podocalyxin的表達(dá)變化，以及來氟米特活性產(chǎn)物A771726干預(yù)后，足細(xì)胞表達(dá)Podocalyxin的變化，來證實(shí)來氟米特（A771726），對高糖培養(yǎng)的人腎小球足細(xì)胞有保護(hù)作用。
　　2、通過觀察高糖環(huán)境下，不同時點(diǎn)足細(xì)胞表達(dá)NF-κB的活化情況，及來氟米特（A771726）干預(yù)后，足細(xì)胞表達(dá)NF-κB、MMP-9的變化，來探討來氟米特對糖尿病腎

2、病(DN)的治療作用及其機(jī)制。
　　方法：
　　1、在高糖環(huán)境下培養(yǎng)足細(xì)胞，Western印跡法檢測不同時間點(diǎn)足細(xì)胞特征蛋白Podocalyxin表達(dá)的變化；再將足細(xì)胞隨機(jī)分組，有正常糖對照組、來氟米特干預(yù)組、高糖組和高滲對照組進(jìn)行培養(yǎng),用Western印跡法檢測各組足細(xì)胞表達(dá)Podocalyxin蛋白的情況。
　　2、Western印跡法檢測不同時間點(diǎn)高糖培養(yǎng)足細(xì)胞NF-κBp65及磷酸化NF-κBp65（P-NF-

3、κBp65）活性；再將足細(xì)胞隨機(jī)分組為正常糖對照組、高滲對照組、高糖組、來氟米特干預(yù)組和PDTC（NF-κB阻斷劑）組，用Western印跡法檢測各組足細(xì)胞MMP-9蛋白的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：
　　1、高糖培養(yǎng)的足細(xì)胞表達(dá)Podocalyxin隨時間持續(xù)下降，在48h時顯著下降；分組實(shí)驗(yàn)表明，與高糖組比較，來氟米特組Podocalyxin表達(dá)明顯增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。
　　2、高糖培養(yǎng)足細(xì)胞在30m