版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡介
1、目的:
1.觀察培養(yǎng)的人腎小球足細(xì)胞(human glomerular podocyte)形態(tài)學(xué),掌握細(xì)胞培養(yǎng)的基本操作過程。
2.觀察來氟米特活性代謝產(chǎn)物A771726對(duì)高糖誘導(dǎo)足細(xì)胞凋亡影響,探討來氟米特對(duì)足細(xì)胞損傷的保護(hù)作用及可能的機(jī)制。
方法:
實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用的足細(xì)胞是一種溫度敏感型永生化人足細(xì)胞系。細(xì)胞復(fù)蘇后在含1%ITS、10%胎牛血清的1640培養(yǎng)液中,33℃、5%CO2
2、條件下傳代增生,細(xì)胞呈鵝卵石狀,之后轉(zhuǎn)入37℃、5%C02 培養(yǎng)箱培養(yǎng)兩周,使其進(jìn)入成熟分化狀態(tài),待細(xì)胞生長融合約至70%-80%時(shí),換無血清RPMI-1640培養(yǎng)液培養(yǎng)24h,待細(xì)胞生長同步后分組。將足細(xì)胞分為正常糖組、甘露醇高滲對(duì)照組、高糖組、高糖+SB202190(p38MAPK通路特異性抑制劑)組及高糖+A771726(來氟米特活性代謝產(chǎn)物)組。Western 印跡檢測(cè)足細(xì)胞p38MAPK及磷酸化p38MAPK(p-p38)活性
3、;流式細(xì)胞儀檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)組足細(xì)胞凋亡率。
結(jié)果:
1.我們檢測(cè)到高糖刺激足細(xì)胞在10min時(shí)p38MAPK信號(hào)通路即開始活化,p-p38蛋白表達(dá)增加,30min 達(dá)高峰,6h 接近基礎(chǔ)水平;而正常糖組和高滲對(duì)照組僅有極少量p38 活化;應(yīng)用p38MAPK信號(hào)通路特異性阻斷劑SB202190可明顯降低高糖刺激引起的p-p38蛋白表達(dá),來氟米特活性代謝產(chǎn)物A771726 亦可減少同一時(shí)間點(diǎn)高糖刺激引起的p-p38蛋
4、白表達(dá)。
2.流式細(xì)胞儀檢測(cè)到高糖刺激24h 以上可見明顯細(xì)胞凋亡,24h 凋亡率為(12.3±0.96)%,48h為(18.6±0.70)%,以48h 凋亡最為明顯,顯著高于正常糖組及甘露醇高滲對(duì)照組。p38MAPK 特異性抑制劑SB202190組48h 足細(xì)胞凋亡率為(13.4±0.85)%,較高糖48h組下降26%;來氟米特活性代謝產(chǎn)物A771726 可以減輕高糖誘導(dǎo)的足細(xì)胞凋亡,20μmol/L來氟米特活性代謝產(chǎn)物
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 來氟米特抑制高糖環(huán)境下smad通路所致的足細(xì)胞凋亡及其機(jī)制研究.pdf
- 來氟米特對(duì)高糖誘導(dǎo)的足細(xì)胞裂孔隔膜及細(xì)胞骨架影響及機(jī)制研究.pdf
- ERK1-2對(duì)高糖環(huán)境下足細(xì)胞凋亡的作用及來氟米特對(duì)其的影響.pdf
- 來氟米特活性代謝產(chǎn)物A77 1726對(duì)滑膜細(xì)胞產(chǎn)生MMP-3的影響.pdf
- 來氟米特對(duì)PAN損傷足細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用及機(jī)制.pdf
- 氟伐他汀對(duì)高糖誘導(dǎo)足細(xì)胞向間葉細(xì)胞轉(zhuǎn)分化的影響.pdf
- 來氟米特對(duì)血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)的大鼠足細(xì)胞nephrin表達(dá)的影響.pdf
- 來氟米特對(duì)高糖環(huán)境下足細(xì)胞NF-κB和MMP-9表達(dá)的影響.pdf
- 來氟米特活性代謝產(chǎn)物對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)滑膜細(xì)胞產(chǎn)生IL-18的影響及其作用機(jī)制.pdf
- 高糖對(duì)足細(xì)胞凋亡和細(xì)胞骨架的影響及其可能的作用機(jī)制研究.pdf
- 高糖刺激對(duì)足細(xì)胞表型及GSK3β活性的影響.pdf
- 高糖、AngⅡ?qū)π∈笞慵?xì)胞凋亡及PKC活性、Nephrin、CD2AP表達(dá)的影響.pdf
- Sp1在高糖誘導(dǎo)腎小球足細(xì)胞凋亡中的作用及機(jī)制研究.pdf
- 高糖、高同型半胱氨酸誘導(dǎo)小鼠足細(xì)胞凋亡的相關(guān)機(jī)制探討.pdf
- 晚期氧化蛋白產(chǎn)物對(duì)足細(xì)胞凋亡的影響及其機(jī)制的研究.pdf
- 干細(xì)胞通過分泌EGF減少高糖誘導(dǎo)的足細(xì)胞凋亡.pdf
- Ghrelin對(duì)高糖誘導(dǎo)心肌細(xì)胞凋亡的影響.pdf
- IQGAP1在高糖誘導(dǎo)足細(xì)胞凋亡中的作用及其機(jī)制探討.pdf
- 來氟米特對(duì)腎癌細(xì)胞增殖和凋亡的影響.pdf
- 胰高血糖素樣肽-1對(duì)晚期氧化蛋白產(chǎn)物誘導(dǎo)足細(xì)胞凋亡的影響及機(jī)制.pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論