高糖對(duì)Schwann細(xì)胞生長、凋亡的影響及其機(jī)制的研究.pdf

1、目的：研究高糖對(duì)體外培養(yǎng)的Schwann細(xì)胞生長、凋亡的影響及其作用機(jī)制 方法：體外建立高糖培養(yǎng)的Schwann細(xì)胞模型，按照培養(yǎng)液中葡萄糖濃度的不同，將實(shí)驗(yàn)分為對(duì)照組(30mmol/L)與高糖組(60mmol/L，90mmol/L)。流式細(xì)胞儀檢測(cè)Schwann細(xì)胞內(nèi)ROS含量；分光光度法檢測(cè)細(xì)胞培液上清中GSH的含量；MTT法觀察Schwann細(xì)胞活力及生長情況；TUNEL檢測(cè)細(xì)胞的凋亡；RT-PCR檢測(cè)細(xì)胞Caspase-

2、3 mRNA的表達(dá)；Western Blot檢測(cè)Schwann細(xì)胞抗凋亡蛋白Bcl-2及凋亡蛋白Bax的表達(dá)情況，同時(shí)檢測(cè) p38MAPK磷酸化的程度。 結(jié)果：①高糖組Schwann細(xì)胞內(nèi)ROS含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于對(duì)照組，結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.01)；同時(shí)，高糖組細(xì)胞培液上清中GSH分泌量明顯低于對(duì)照組（P﹤0.01）。②高糖組細(xì)胞生長受到抑制，培養(yǎng)液糖濃度60mmol/L及90mmol/L組均有抑制作用（P﹤0.05），且90mm

3、ol/L組的抑制作用強(qiáng)于60mmol/L組（P﹤0.05）；細(xì)胞凋亡結(jié)果顯示高糖組細(xì)胞凋亡數(shù)目明顯增多，凋亡率與對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹤0.05）；RT-PCR結(jié)果顯示高糖組Caspase-3 mRNA的表達(dá)量較對(duì)照組明顯升高（P﹤0.05），且隨著培液中葡萄糖濃度的升高，Caspase-3表達(dá)也相應(yīng)增高。③Western Blot結(jié)果顯示高糖組Bcl-2蛋白表達(dá)下降（P﹤0.05），且90mmol/L組具有非常顯著性差異（P﹤0.

4、01）；高糖組Bax蛋白表達(dá)升高，結(jié)果與對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹤0.05）；高糖組磷酸化p38MAPK的相對(duì)表達(dá)量明顯高于對(duì)照組（P﹤0.01）。 結(jié)論：高糖抑制Schwann細(xì)胞生長，促進(jìn)細(xì)胞凋亡。其可能的作用機(jī)制是：高糖引起Schwann細(xì)胞內(nèi)ROS含量增加，抗氧化劑GSH分泌減少，從而產(chǎn)生氧化應(yīng)激作用；氧化應(yīng)激激活Schwann細(xì)胞的p38MAPK信號(hào)通路，有活性的磷酸化p38MAPK含量升高，誘導(dǎo)細(xì)胞抗凋亡蛋白Bcl