攜帶Il-24基因的Ki67啟動(dòng)子調(diào)控增殖腺病毒治療黑素瘤研究.pdf_第1頁(yè)
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1、目的：研究攜帶IL-24基因的Ki67啟動(dòng)子調(diào)控增殖腺病毒Ki67-ZD55-IL24對(duì)黑素瘤A375細(xì)胞增殖和凋亡的影響。
　　方法：將ZD55-EGFP、Ki67-ZD55、ZD55-IL24和Ki67-ZD55-IL24四種腺病毒分別作用于黑素瘤A375細(xì)胞。RT-PCR方法檢測(cè)Ki67-promoter mRNA及IL-24mRNA的表達(dá)；流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡指數(shù)；MTT法檢測(cè)細(xì)胞存活率；WesternBlot檢測(cè)EIA

2、、IL-24和線粒體途徑凋亡相關(guān)蛋白BAX、Bcl-XL、Mcl-1、Caspase-3的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：RT-PCR結(jié)果顯示Ki67-ZD55和Ki67-ZD55-IL24都能在黑素瘤A375細(xì)胞中表達(dá)Ki67啟動(dòng)子序列，ZD55-IL24和Ki67-ZD55-IL24都能將IL-24基因轉(zhuǎn)入到黑素瘤A375細(xì)胞中；流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果顯示四種腺病毒對(duì)黑素瘤A375細(xì)胞都具有誘導(dǎo)凋亡作用，且Ki67-ZD55-IL24的誘導(dǎo)

3、凋亡率比ZD55-EGFP、Ki67-ZD55、ZD55-IL24更高(P<0.05)；MTT結(jié)果表明Ki67-ZD55-IL24對(duì)黑素瘤A375細(xì)胞的增殖具有明顯抑制作用，且Ki67-ZD55-IL24的抑制作用比ZD55-EGFP、Ki67-ZD55、ZD55-IL24更強(qiáng)(P<0.05)；Western Blot檢測(cè)結(jié)果表明Ki67-ZD55-IL24和ZD55-IL24干預(yù)的黑素瘤A375細(xì)胞都能夠高效表達(dá)IL-24，同時(shí)Ki6

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