銀杏酸單體的制備及分析方法的研究.pdf

1、銀杏酸(GKA)具有致敏性、胚胎毒性、免疫毒性和細(xì)胞毒性等生物毒性,被認(rèn)為是銀杏葉提取物EGb及其制劑中的主要毒副作用成分。要求其含量必須限制在5 ppm,銀杏酸的含量已經(jīng)成了銀杏制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的一個(gè)主要控制指標(biāo)。本課題旨在研究建立純化和制備高純度銀杏酸單體的方法及銀杏酸的分析方法。
　　 本文以銀杏外種皮作為提取總銀杏酸的原料,粗提物通過(guò)中壓硅膠柱純化,再采用制備高效液相色譜制備銀杏酸單體,并對(duì)其純度和結(jié)構(gòu)進(jìn)行了分析,探討了U

2、PLC和LC／MS／MS兩種分析方法。
　　 在總銀杏酸的提取中,對(duì)提取溶劑、硅膠柱層析的洗脫劑、洗脫流速及上樣量進(jìn)行了考察,最佳的提取及純化工藝為:采用石油醚(60～90℃)常溫浸泡提取,以石油醚(60～90℃)一乙醚一甲酸,體積比89:11:1為洗脫劑,洗脫速率15.0 mL·min-1,上樣量10.0 g。在此條件下,硅膠柱的回收率達(dá)87.46％。
　　 銀杏酸單體的制備條件:色譜柱Waters XBridgeTM

3、 C18(19×150 mm,5μm),流動(dòng)相甲醇-1％醋酸水溶液,流速25 mL·min-1,上樣量75～85 mg,檢測(cè)波長(zhǎng)310 nm。在上述制備條件下,各銀杏酸單體的分離度良好,分離所需時(shí)間也較合理,分離得到6種銀杏酸單體,首次實(shí)現(xiàn)了6-(8-十七碳烯基)水楊酸(C17:1)順?lè)串悩?gòu)體的分離,測(cè)定的純度C13:0,99.65％；C15:1,99.84％；C17:2,99.78％；C15:0,99.76％；順式C17:1,99.6