腹腔鏡手術(shù)和開腹手術(shù)對闌尾炎兒童NOD1和NOD2信號通路的影響.pdf

1、目的：手術(shù)應激可以導致機體免疫功能受損，使得機體對病原微生物的易感性增加，術(shù)后并發(fā)癥和死亡率相應升高，但對其確切機制缺乏了解。NOD1和NOD2是新近發(fā)現(xiàn)的一類模式識別受體，在固有免疫細胞針對胞內(nèi)菌啟動免疫應答過程中發(fā)揮重要作用。本課題擬通過比較腹腔鏡手術(shù)和開腹手術(shù)不同時間點NOD1和NOD2表達水平及功能的變化，探討不同手術(shù)方式引起的應激反應對NOD1和NOD2介導的固有免疫應答反應的影響。
　　方法：選取2014年09月至20

2、15年3月就診于蘇州大學附屬兒童醫(yī)院普外科診斷為急性闌尾炎且具有手術(shù)指征患兒共30例，隨機分成腹腔鏡闌尾切除術(shù)組（Laparoscopic appendicectomy，LA）和開腹闌尾切除術(shù)組（Open appendicectomy，OA），分別于術(shù)前、術(shù)后及術(shù)后1天采集外周血2ml，提取外周血單個核細胞（peripheral blood mononuclear cells, PBMCs），應用Real-time PCR檢測PBMCs

3、中NOD1、NOD2基因的表達水平；另外全血分別經(jīng)Tri-DAP、MDP刺激后收集上清液，應用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定上清液中腫瘤壞死因子-ɑ（Tumor Necrosis Factor-alpha,TNF-ɑ)和白細胞介素6（Interleukin6，IL-6）的濃度；采用Western-Blot法檢測LA組及OA組各個時間點NOD信號通路的活化水平。
　　結(jié)果：1.在LA組，術(shù)后NOD1、NOD2表達較術(shù)前無明顯改變，

4、NOD1在術(shù)后1天高于術(shù)前水平；在OA組，術(shù)后NOD1表達較術(shù)前明顯下降（P<0.01），術(shù)后1天基本恢復到術(shù)前水平；LA組及OA組術(shù)前、術(shù)后、術(shù)后1天NOD2表達均無明顯改變。
　　2.LA組和OA組樣本經(jīng)Tri-DAP和MDP刺激后均表達TNF-α和IL-6。與術(shù)前比較，OA組術(shù)后Tri-DAP刺激產(chǎn)生TNF-α的水平較低，術(shù)后1天基本恢復；LA組術(shù)后Tri-DAP刺激產(chǎn)生TNF-α的水平與術(shù)前無顯著差異。兩組樣本手術(shù)前后Tr

5、i-DAP刺激產(chǎn)生IL-6的水平無明顯差異。兩組樣本手術(shù)前后MDP刺激產(chǎn)生TNF-α和IL-6的水平也無明顯差異。
　　3.PBMCs經(jīng)Tri-DAP和MDP分別刺激后，LA組在各個時間點RIP2磷酸化水平無明顯變化；而OA組在術(shù)后及術(shù)后1天RIP2磷酸化水平均明顯降低。
　　結(jié)論：1.手術(shù)應激可以引起NOD1表達水平降低，但對NOD2的表達沒有影響。與開腹手術(shù)相比，腹腔鏡手術(shù)可以明顯緩解手術(shù)應激對NOD1表達水平的影響。<