甲鈷胺對周圍神經(jīng)損傷后運動終板再生修復的影響.pdf

1、周圍神經(jīng)損傷后骨骼肌功能的恢復一直是神經(jīng)科學領域的一大熱點問題。骨骼肌是周圍神經(jīng)系統(tǒng)的靶器官，骨骼肌正常功能的維持有賴于神經(jīng)的支配和調(diào)節(jié)。周圍神經(jīng)損傷后，骨骼肌如果不能及時獲得神經(jīng)再支配，將發(fā)生不可逆的萎縮甚至功能喪失。軀體運動神經(jīng)末梢，形態(tài)學常稱運動終板(motor end plat,MEP)，生理學又稱神經(jīng)肌肉接頭(neuromuscular junction,NMJ)是存在于骨骼肌和神經(jīng)纖維之間的特化區(qū)域。神經(jīng)功能的再生和修復最終

2、要靠運動終板的再生與重建，終板的功能狀態(tài)反映肌肉的功能狀態(tài)。近年來，國內(nèi)外做了大量關于周圍神經(jīng)損傷的研究，雖然取得了進步，但神經(jīng)功能的恢復仍不能令人滿意。有研究發(fā)現(xiàn)：甲鈷胺能促進髓鞘的主要成分——卵磷脂的合成，并且能參與神經(jīng)遞質(zhì)乙酰膽堿(acetylcholine,ACh)合成，促進軸漿轉(zhuǎn)運和軸突再生，在治療周圍神經(jīng)病變特別是糖尿病方面的療效已得到了動物實驗及臨床的證實，但其對神經(jīng)損傷后骨骼肌及其運動終板再生恢復作用及其機制報道較少，特

3、別是甲鈷胺對神經(jīng)損傷后運動終板乙酰膽堿酯酶(acetylcholinesterase,AChE)、乙酰膽堿受體(acetylcholinereceptor,AChR)的變化報導較少。因此，本實驗構(gòu)建大鼠坐骨神經(jīng)損傷模型，局部注射甲鈷胺，觀察不同時間神經(jīng)電生理、肌肉濕重、運動終板形態(tài)、乙酰膽堿酯酶、乙酰膽堿受體的變化，探討甲鈷胺對神經(jīng)損傷后運動終板恢復的促進作用，并為臨床神經(jīng)疾患的治療提供理論依據(jù)。
　　 方法：實驗選取成年雄性w

4、istar大鼠(250-300g)90只，隨機分成A組(甲鈷胺組)、B(生理鹽水對照組)兩組，每組45只。通過鉗夾大鼠坐骨神經(jīng)制備神經(jīng)損傷模型，術后約2-3小時動物意識恢復，局部注射藥物。A組每日注射甲鈷胺400μl/kg，B組每日注射等量生理鹽水。術后1、4、8周分別隨機取A、B組大鼠各15只，測定其神經(jīng)傳導速度來評價神經(jīng)功能，然后完整解剖分離腓腸肌用天平稱其濕重。取肌組織分別行氯化金染色，光鏡下觀察運動終板的變化；AChE酶組織化學

5、染色觀察AChE的含量變化，并結(jié)合圖像分析系統(tǒng)進行光密度測定；AChR熒光染色，觀察乙酰膽堿受體變化；所有數(shù)據(jù)行統(tǒng)計學分析。
　　 結(jié)果：1，術后1周所有大鼠損傷側(cè)足部潰瘍，站立困難。神經(jīng)傳導速度降低，兩組相比無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。兩組腓腸肌濕重無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。兩組鏡下運動終板均出現(xiàn)退變，軸突終末分枝減少。AChE染色：AChE含量減少，兩組光密度分析無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。兩組乙酰膽堿受體形態(tài)不完整

6、，皺褶減少。2，術后4周A組大鼠較B組好轉(zhuǎn)明顯，B組，走路步態(tài)不協(xié)調(diào)。A組較B組神經(jīng)傳導速度有所恢復，兩組相比有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。腓腸肌濕重兩組相比有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。A組運動終板數(shù)量增加，染色較深，形態(tài)不規(guī)則。B組運動終板數(shù)量增加不明顯，染色較淡，形態(tài)多呈不規(guī)則狀。AChE染色：兩組AChE的陽性區(qū)光密度分析有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。兩組乙酰膽堿受體數(shù)量增加A組形態(tài)趨于完整，B組形態(tài)仍不規(guī)則。3，術后8周A組大

7、鼠傷口已愈合，步態(tài)協(xié)調(diào)。B組走路仍有歪斜。神經(jīng)傳導速度A組較B組明顯恢復，兩組相比有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。A組與B組腓腸肌濕重統(tǒng)計學有明顯差異(P＜0.01)。A組運動終板形態(tài)與著色接近正常，B組沒有明顯變化。AChE染色：A組AChE活性明顯高于B組，兩組陽性區(qū)光密度分析有顯著差異(P＜0.01)。A組乙酰膽堿受體形態(tài)漸趨成熟，B組仍不規(guī)則。
　　 結(jié)論：
　　 1，甲鈷胺能延緩周圍神經(jīng)損傷后運動終板的退變、促進