孕早期HCMV感染對子代大鼠海馬鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶Ⅱ表達(dá)的影響.pdf

1、目的：探討HCMV先天性感染對子代大鼠海馬鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)表達(dá)的影響,為進(jìn)一步研究HCMV先天性感染對子代大鼠海馬學(xué)習(xí)記憶損傷的機制及防治HCMV先天性感染導(dǎo)致的學(xué)習(xí)記憶障礙等神經(jīng)殘疾后遺癥提供科學(xué)的實驗依據(jù)。
　　方法：將SPF級SD見栓孕大鼠隨機分為實驗組與對照組,每組各10只。用HCMV致細(xì)胞病變效應(yīng)(CPE)達(dá)+++~++++的病毒懸液接種第5代HELF細(xì)胞,待細(xì)胞變性95％以上,于妊娠第4天分別在實

2、驗組孕鼠腹腔內(nèi)注射HCMV懸液0.5 mL和對照組孕鼠腹腔內(nèi)注射等量的人胚成纖維細(xì)胞上清液。子代大鼠30~60天時制備海馬神經(jīng)細(xì)胞并熒光測定其游離鈣離子濃度([Ca2+]i)。取子代大鼠腦組織進(jìn)行海馬的病理學(xué)觀察,及海馬CaMKⅡ的免疫組化和蛋白印跡實驗。最后進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)比較研究。
　　結(jié)果：與對照組比較,光鏡下實驗組子代大鼠腦組織海馬細(xì)胞帶細(xì)胞數(shù)有所減少,組織結(jié)構(gòu)稀疏,細(xì)胞排列紊亂,神經(jīng)元退變消失;熒光測定結(jié)果顯示孕早期HCMV感

3、染實驗組子代大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞[Ca2+]濃度(153.47±37.26nmol/L)明顯高于對照組(102.32±21.33nmol/L),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01);光鏡下免疫組化反應(yīng)陽性產(chǎn)物呈棕褐色,主要位于錐體細(xì)胞胞質(zhì)。實驗組子代大鼠CaMKⅡ免疫陽性細(xì)胞平均光密度值(0.2139±0.1125)顯著低于對照組(0.2511±0.1097),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);實驗組子代大鼠CaMKⅡ免疫印跡平均光密度值(0.