TAC方案新輔助化療前后乳腺癌原代細(xì)胞化療藥物敏感性研究.pdf

1、目的:
　　 掌握乳腺癌原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法，探討膠原凝膠包埋培養(yǎng)法體外藥敏檢測(cè)技術(shù)(CD-DST)篩選敏感性抗癌藥物的可行性，分析TAC方案新輔助化療前后乳腺癌原代細(xì)胞對(duì)5個(gè)化療藥物（多西他賽、吡柔比星、表柔比星、長(zhǎng)春瑞濱、順鉑）敏感性的變化。
　　 方法:
　　 1.選取2011年1月-2012年1月未行新輔助化療而直接手術(shù)的291例乳腺癌新鮮瘤組織作為化療前組;選取同期行4-6個(gè)周期TAC方案(多西他賽75m

2、g/m2+吡柔比星40mg/m2+環(huán)磷酰胺600mg/m2，q3w)新輔助化療的34例乳腺癌患者中未達(dá)到病理完全緩解的27例新鮮瘤組織作為化療后組，每一標(biāo)本均進(jìn)行體外細(xì)胞分離、原代培養(yǎng)。
　　 2.將乳腺癌原代細(xì)胞包埋在人工細(xì)胞外基質(zhì)Ⅰ-型膠原凝膠體中，構(gòu)成與體內(nèi)細(xì)胞相似的生長(zhǎng)微環(huán)境，三維立體培養(yǎng)，加入適宜濃度（根據(jù)藥物血漿濃度時(shí)間曲線下面積計(jì)算出）的化療藥物（多西他賽、表柔比星、吡柔比星、長(zhǎng)春瑞濱及順鉑）接觸，最后經(jīng)過細(xì)胞染色

3、及利用圖像分析對(duì)藥物敏感性做出準(zhǔn)確的評(píng)價(jià)。其結(jié)果用T/C的百分比值表示，其中T為加藥處理組的光密度值，C為空白對(duì)照光密度值。結(jié)果判定，T/C≤50％表示腫瘤對(duì)化療藥物敏感，T/C＞50％表示腫瘤對(duì)化療藥物不敏感。某化療藥物單藥有效率=對(duì)該化療藥物敏感的患者數(shù)/患者總數(shù)。
　　 3.所有的數(shù)據(jù)均采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析。計(jì)數(shù)資料組間的比較采用x2檢驗(yàn)。以P＜0.05作為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。
　　 結(jié)果

4、:
　　 1.成功培養(yǎng)出人類乳腺癌原代細(xì)胞:乳腺癌細(xì)胞分離培養(yǎng)約2周后呈較穩(wěn)定地生長(zhǎng)增殖狀態(tài)，癌細(xì)胞呈梭行貼壁生長(zhǎng)，中間夾雜少量間質(zhì)細(xì)胞呈多角形伸展?fàn)钌L(zhǎng)。
　　 2.膠原凝膠包埋培養(yǎng)法體外藥敏檢測(cè)技術(shù)(CD-DST)可評(píng)價(jià)率高、所需標(biāo)本量?。?×103個(gè)細(xì)胞/滴）的特點(diǎn)，可擴(kuò)大該技術(shù)的應(yīng)用范圍，彌補(bǔ)了目前其它體外藥敏技術(shù)的不足，具有臨床應(yīng)用的可行性。
　　 3.未行TAC方案新輔助化療的乳腺癌，5個(gè)化療藥物單藥

5、有效率由高到低依次為:多西他賽(50.9％)、吡柔比星(48.5％)、表柔比星(42.6％)、順鉑(29.2％)、長(zhǎng)春瑞濱(23.7％)，其中多西他賽和蒽環(huán)霉素單藥有效率明顯高于順鉑和長(zhǎng)春瑞濱(P＜0.05)，而多西他賽與蒽環(huán)霉素之間以及順鉑與長(zhǎng)春瑞濱之間單藥有效率的差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。多西他賽在老年性乳腺癌患者組（年齡≥65歲）的單藥有效率低(x2=9.202，P=0.002)。病理學(xué)組織分級(jí)低（組織學(xué)Ⅰ-Ⅱ級(jí)）和浸

6、潤(rùn)性小葉癌對(duì)吡柔比星不敏感(P＜0.05)。
　　 4.TAC方案新輔助化療后的乳腺癌，5個(gè)化療藥物單藥有效率由高到低依次為:順鉑(48.1％)、多西他賽(33.3％)=長(zhǎng)春瑞濱(33.3％)、吡柔比星(22.2％)=表柔比星(22.2％)。單藥之間進(jìn)行兩兩比較，順鉑單藥有效率高于吡柔比星和表柔比星(x2=3.979，P=0.046)，其它組間差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 5.TAC方案新輔助化療后的乳腺

7、癌，吡柔比星(x2=6.839，P=0.009)和表柔比星(x2=4.156，P=0.041)的單藥有效率比化療前降低，但順鉑的單藥有效率增高(x2=4.156，P=0.009)，對(duì)多西他賽和長(zhǎng)春瑞濱敏感性變化不明顯(P＞0.05)
　　 結(jié)論:
　　 1.本實(shí)驗(yàn)成功的從乳腺癌新鮮組織中分離培養(yǎng)出人類乳腺癌原代細(xì)胞。
　　 2.膠原凝膠包埋培養(yǎng)法體外藥敏檢測(cè)技術(shù)(CD-DST)具有篩選敏感性抗癌藥物的可行性，且臨