結(jié)核分枝桿菌三種抗原的制備和鑒定.pdf_第1頁
已閱讀1頁,還剩52頁未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、目的:
  結(jié)核病(tuberculosis,TB)是嚴(yán)重危害我國和全球人類健康的重要公共衛(wèi)生問題之一。目前,卡介苗(BCG)仍是用于人類結(jié)核病預(yù)防的唯一疫苗。它能夠有效預(yù)防嬰幼兒結(jié)核性腦膜炎和粟粒性肺結(jié)核等的發(fā)生,但對成人肺結(jié)核的保護(hù)效果不穩(wěn)定、且不能阻止?jié)摲腥窘Y(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tb)的再激活。主要原因在于:從牛型分枝桿菌(M. bovis)減毒制備BCG的過程中,重要毒力

2、基因的缺失的同時,導(dǎo)致BCG誘導(dǎo)CD8+T細(xì)胞反應(yīng)能力下降;BCG免疫機(jī)體對潛伏M.tb的相關(guān)抗原僅有弱或無應(yīng)答。國內(nèi)外學(xué)者正在進(jìn)行新型候選疫苗的研究。已報道的新型候選疫苗,主要是以M.tb活躍生長繁殖階段表達(dá)的抗原為基礎(chǔ)構(gòu)建的,因此可能與BCG存在同樣缺陷,即無法有效清除潛伏感染的M.tb。因此,在新型候選疫苗的研制中,潛伏相關(guān)抗原的作用愈來愈被重視。目前通過基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)等技術(shù)發(fā)現(xiàn)了與潛伏M.tb感染相關(guān)的重要調(diào)節(jié)系統(tǒng)DosR(

3、活化DosR調(diào)節(jié)系統(tǒng)引起表達(dá)的抗原Rv2623、Rv2626c)和持續(xù)感染期的代謝調(diào)節(jié)基因PhoY2。本研究擬在E.coli中表達(dá)純化Rv2623、Rv2626c和PhoY2,并選用中國人群,通過全血IFN-γ釋放試驗(Whole blood IFN-γrelease assay,WBIA)對這三種抗原的免疫原性做初步分析,篩選和驗證這些抗原是否可以用于中國新型TB疫苗的研制,為之后新型疫苗的研發(fā)奠定工作基礎(chǔ)。
  方法:

4、  1、分別構(gòu)建重組質(zhì)粒pET2623、pET2626c和pETPhoY2;
  2、重組蛋白rRv2623、rRv2626c和rPhoY2的表達(dá)、純化及驗證;
  3、結(jié)核感染者和非感染對照者的篩查和招募;
  4、重組蛋白刺激受試者全血并檢測刺激后血漿中IFN-γ含量;
  5、分析各蛋白刺激 TB感染人群和非感染人群產(chǎn)生的IFN-γ水平的差異以及三種蛋白刺激TB感染人群產(chǎn)生的IFN-γ水平的差異;
 

5、 結(jié)果:
  1、分別成功構(gòu)建、表達(dá)并純化了rRv2623、rRv2626c和rPhoY2蛋白;
  2、51例受試者被招募,包括結(jié)核感染者28例、非感染對照者23例;
  3、重組蛋白rRv2623、rRv2626c和rPhoY2均具有較好的免疫原性,分別刺激TB感染人群產(chǎn)生的IFN-γ水平為724.32pg/ml、410.20pg/ml和562.01pg/ml,均顯著高于非感染人群(P<0.05)。
  結(jié)論

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論