骨肉瘤中RASSF1A基因甲基化檢測與其臨床診斷關(guān)系研究.pdf

1、目的:骨肉瘤是最常見的原發(fā)性惡性骨腫瘤之一，其具有明顯的軟組織侵襲性以及高度遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移傾向，臨床早期診斷困難。本研究通過對骨肉瘤細(xì)胞系，骨肉瘤組織、正常骨組織及同一患者對應(yīng)的術(shù)前血漿中RASSF1A基因甲基化的檢測，加深對骨肉瘤發(fā)病分子機(jī)制的了解并探討RASSF1A基因甲基化作為骨肉瘤臨床診斷的分子標(biāo)志物的可行性。
　　方法:1.甲基化特異性PCR法檢測骨肉瘤細(xì)胞系MG-63、MNNG/HOSC1、Saos-2中RASSF1A基因啟

2、動子甲基化狀況;2.甲基化特異性PCR法檢測30例骨肉瘤患者血漿、腫瘤組織及15例健康志愿者骨組織和血漿中RASSF1A基因啟動子甲基化狀況;3.分析RASSF1A基因甲基化與患者性別、年齡、腫瘤位置、腫瘤分化、腫瘤轉(zhuǎn)移等臨床病理特征的相關(guān)性。
　　結(jié)果:1.骨肉瘤細(xì)胞系MG-63中未檢測到RASSF1A基因甲基化，而MNNG/HOSC1和Saos-2細(xì)胞中檢測到了RASSF1A基因甲基化。2.骨肉瘤組織中RASSF1A基因啟動子

3、甲基化陽性率為40％(12/30)，同一患者血漿甲基化陽性率為26.7％(8/30)。12例腫瘤組織甲基化陽性患者其血漿甲基化陽性共8例，癌組織和血漿RASSF1A甲基化一致率為66.7％(8/12)，18例癌組織甲基化陰性化者其血漿甲基化也為陰性。3.健康志愿者骨組織和血漿RASSF1A基因啟動子甲基化陽性率均為0。骨肉瘤組織和正常骨組織RASSF1A基因啟動子甲基化陽性率具有明顯差異(p＜0.05)，骨肉瘤患者血漿和健康志愿者血漿R

4、ASSF1A基因啟動子甲基化陽性率具有明顯差異(p＜0.05)。4.Kappa一致性檢驗顯示骨肉瘤組織和血漿中RASSF1A甲基化水平具有一致性（Kappa值=0.133，p＜0.05），骨肉瘤組織和血漿中RASSF1A基因甲基化水平與患者的性別、年齡、腫瘤位置無關(guān)(p＞0.05)，而與腫瘤的分化及有無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有關(guān)(p＜0.05)。
　　結(jié)論:不同骨肉瘤細(xì)胞系中RASSF1A基因甲基化情況不一致。骨肉瘤患者血漿中RASSF1A基因