脂質(zhì)制劑的腸道轉(zhuǎn)運(yùn)研究及脂解-吸收模型的建立.pdf

1、脂質(zhì)制劑是由油、親水性或親油性表面活性劑和助溶劑等一系列不同性質(zhì)的輔料組成，按其體系關(guān)鍵性質(zhì)特征分為四類，即Ⅰ型、Ⅱ型、ⅢA型、ⅢB型、Ⅳ型。脂質(zhì)制劑可以顯著提高水難溶性藥物口服生物利用度。脂質(zhì)制劑生物利用度的優(yōu)勢(shì)主要?dú)w功于由外源性脂質(zhì)消化產(chǎn)物和腸道中內(nèi)源性產(chǎn)生的膽鹽、磷脂等混合而形成的膠體腸消化相，即混合膠束，具顯著增溶作用從而促進(jìn)藥物的吸收，因此腸道消化作用對(duì)脂質(zhì)制劑的藥物分配和吸收具有關(guān)鍵性的影響。
　　 本課題以吲哚美辛

2、為模型藥物，利用體外脂解模型模擬腸道生理環(huán)境--采用pH-stat維持腸道中pH，使用豬胰脂酶-大腸桿菌噬菌體成分作為人胰液的模型，將膽鹽-卵磷脂混合膠束加入到反應(yīng)體系中，為降解產(chǎn)物的溶解提供漏槽條件；研究腸道消化作用對(duì)各類(Ⅰ型、Ⅱ型、ⅢA型、ⅢB型、Ⅳ型)脂質(zhì)制劑中藥物分配的影響；在脂解過程中用電導(dǎo)率法和光學(xué)顯微鏡法，研究各類脂質(zhì)制劑在腸道脂解行為下產(chǎn)生微觀形態(tài)變化的規(guī)律，并且探討各類脂質(zhì)制劑脂解后藥物分配與體系中微觀形態(tài)的關(guān)聯(lián)性；

3、本研究還根據(jù)脂質(zhì)制劑的體內(nèi)特性，利用灰關(guān)聯(lián)分析法和Box-Behnken響應(yīng)面設(shè)計(jì)方法建立一種新的脂解-吸收模型，分析模型參數(shù)對(duì)性能的影響，且利用該脂解-吸收模型評(píng)價(jià)常規(guī)體外方法(如偽三元相圖、溶解度、自乳化效能、粒徑等)篩選的脂質(zhì)制劑；本研究利用新建立的脂解-吸收模型，研究各類脂質(zhì)制劑的腸道吸收規(guī)律，采用點(diǎn)對(duì)點(diǎn)相關(guān)水平分析方法，以大鼠口服吸收給藥后的體內(nèi)吸收分?jǐn)?shù)作為體內(nèi)參數(shù)，以脂解-吸收模型或傳統(tǒng)外翻腸囊法的體外吸收分?jǐn)?shù)作為體外參數(shù)，

4、建立體內(nèi)外相關(guān)性，比較各類脂質(zhì)制劑的差異；探討各類脂質(zhì)制劑脂解后藥物的分配規(guī)律、脂解-吸收模型法得到的體外吸收規(guī)律與大鼠口服的體內(nèi)吸收規(guī)律之間的關(guān)聯(lián)性。
　　 研究顯示，在禁食或非禁食條件下四類脂質(zhì)制劑脂解后水性分散相對(duì)藥物的溶解能力均顯著高于消化液、膽鹽-卵磷脂混合膠束溶液和在膽鹽-卵磷脂混合膠束溶液中分散而未消化的脂質(zhì)制劑，說明腸消化作用對(duì)藥物具有顯著的增溶作用，且水性分散相對(duì)藥物增溶作用的強(qiáng)弱為Ⅰ型>Ⅱ型>ⅢA型>ⅢB型>

5、Ⅳ型，然而各類脂質(zhì)制劑經(jīng)腸消化后吲哚美辛分配入水性分散相的藥物比例大小依次為ⅢA型>Ⅳ型>ⅢB型>Ⅱ型>Ⅰ型；在快速消化期中各類脂質(zhì)制劑的脂解速率快慢依次為Ⅰ型>Ⅱ型>ⅢA型>ⅢB型>Ⅳ型。水性分散相對(duì)藥物的增溶作用趨勢(shì)、脂解速率規(guī)律與消化后藥物分配規(guī)律的不一致性，說明雖脂質(zhì)制劑的脂解速率與程度高、水性分散相對(duì)藥物的增溶作用強(qiáng)均有利于藥物溶解，但在腸道脂解行為中可能存在其它的重要因素，如特殊微觀形態(tài)的產(chǎn)生、變化等，影響藥物在腸道中的分配

6、，而這些因素可能決定于各類脂質(zhì)制劑處方配比結(jié)構(gòu)和性質(zhì)之間的差異。
　　 為此，本課題還進(jìn)一步研究脂質(zhì)制劑在脂解過程中微觀形態(tài)的變化，結(jié)果顯示，除ⅢA型外，其他各類脂質(zhì)制劑脂解過程中體系電導(dǎo)率，均為先增后減，再增大到極值后緩慢減小，且體系電導(dǎo)率先增后減，再增到極值這一過程均發(fā)生于脂質(zhì)制劑的快速消化期。電導(dǎo)率驟降現(xiàn)象反映在脂解過程中有液晶相產(chǎn)生；在快速消化期間電導(dǎo)率驟降這一過程持續(xù)時(shí)間依次為Ⅰ型>Ⅱ型>ⅢB型>Ⅳ型，反映這幾類脂質(zhì)制

7、劑在脂解過程中液晶相的持續(xù)時(shí)間長短；而ⅢA型在腸消化過程電導(dǎo)率未有上述驟降現(xiàn)象，說明其可能未產(chǎn)生液晶相。再者，用顯微鏡觀察脂質(zhì)制劑脂解過程中的微觀結(jié)構(gòu)變化，也發(fā)現(xiàn)液晶相的持續(xù)時(shí)間長度依次為Ⅰ型>Ⅱ型>ⅢB型>Ⅳ型，而在ⅢA型中未觀察到液晶相，這正好對(duì)電導(dǎo)率的數(shù)據(jù)進(jìn)行了有力的佐證。研究還發(fā)現(xiàn)，脂質(zhì)制劑脂解過程中液晶相持續(xù)時(shí)間的長短與脂解后藥物分配入水性分散相的藥物比例成反比，說明在脂質(zhì)制劑脂解過程中液晶相的產(chǎn)生會(huì)阻礙藥物分配入水性分散相而

8、導(dǎo)致藥物沉淀。
　　 本課題建立了一種新的脂解-吸收模型，并對(duì)該模型進(jìn)行來了優(yōu)化，腸組織培養(yǎng)液(禁食)為 Trizma mealate50 mM、NaCl150 mM、PC1.25mM、NaTDC5mM、K+3.7mM、Ca2+5mM、D-glucose12.06mM、Pancreatin4938.34TBU和pH7.37；研究中發(fā)現(xiàn)，葡萄糖、胰脂酶提取物的濃度變化和pH的改變對(duì)該模型中腸組織活性有顯著性影響，而在固定pH條件下

9、，對(duì)脂質(zhì)制劑在該體系內(nèi)脂肪酸的釋放量有顯著影響的則是Ca2+和胰脂酶提取物的溶度；效應(yīng)面法分析結(jié)果顯示，腸活性衰減率隨pH增大而先減小后增大，隨著葡萄糖濃度增大而減小，隨胰脂酶提取物濃度增大是先減小后增大；然而脂質(zhì)制劑在體系內(nèi)脂肪酸的釋放量則是隨pH、胰脂酶提取物濃度的增大而遞增。
　　 利用偽三元相圖法、溶解度、自乳化效能、自乳化外觀及粒徑等常規(guī)方法篩選的優(yōu)處方為Labrafac@Lipohile wl1349、Cremoph

10、or RH40、TranscutolP=10:67.5:22.5或20:60:20；而利用脂解-吸收模型法篩選的處方為Labrafac@Lipohile wl1349、Cremophor RH40、Transcutol P=20:60:20或40:45:15。這兩種方法所得結(jié)果的差異性，提示評(píng)價(jià)、篩選脂質(zhì)制劑的常規(guī)方法僅僅考察制劑體外物理屬性，不能準(zhǔn)確地反映藥物的體內(nèi)狀態(tài)，而新模型則彌補(bǔ)了常規(guī)方法的不足，可更準(zhǔn)確地評(píng)價(jià)、篩選脂質(zhì)制劑。<

11、br>　　 利用新建的脂解-吸收模型進(jìn)行脂質(zhì)制劑的腸吸收研究，各類脂質(zhì)制劑體外累積吸收率(2h)大小依次為：ⅢA型>Ⅳ型>ⅢB型>Ⅱ型>Ⅰ型。該結(jié)果與脂解后藥物的分配規(guī)律呈一致，也與脂解過程中各類脂質(zhì)制劑微觀形態(tài)變化規(guī)律具良好關(guān)聯(lián)性。這一說明，ⅢA型在消化作用下對(duì)藥物在腸道分配、吸收能力最強(qiáng)，而且脂解過程中微觀形態(tài)的變化(如液晶相的產(chǎn)生)確實(shí)與藥物的分配、吸收緊密關(guān)聯(lián)，這些更加全面了脂質(zhì)制劑的腸道轉(zhuǎn)運(yùn)研究。另外，各脂質(zhì)制劑在傳統(tǒng)外翻腸

12、囊法所得吸收規(guī)律與體外脂解法所得藥物分配規(guī)律的不一致性，說明消化作用對(duì)于影響脂質(zhì)制劑中藥物在腸道的分配、吸收的重要性。
　　 脂質(zhì)制劑體外累積吸收率和體內(nèi)吸收百分?jǐn)?shù)的體內(nèi)外吸收相關(guān)性的分析顯示，在禁食條件下，脂解-吸收模型法的體外累積吸收率(fa)與體內(nèi)吸收百分?jǐn)?shù)(Pa)之間具有極顯著相關(guān)性；在非禁食條件下fa與Pa之間也具有顯著相關(guān)性，而經(jīng)傳統(tǒng)翻腸囊法的fa與Pa之間無顯著性相關(guān)。這是由于模型的腸組織培養(yǎng)體系對(duì)脂質(zhì)制劑中水難溶

13、藥物具較強(qiáng)的增溶作用，有利于維持水難溶性藥物的溶解狀態(tài)，從而更能準(zhǔn)確地反映藥物腸吸收情況，這進(jìn)一步說明了消化作用對(duì)脂質(zhì)制劑中藥物在腸道的分配、吸收能力具顯著性地影響，這些更加具體化了脂質(zhì)制劑的腸道轉(zhuǎn)運(yùn)研究。
　　 本文以吲哚美辛為模型藥物，研究了脂質(zhì)制劑的腸道脂解行為規(guī)律，并利用一種新建立、優(yōu)化的脂解-吸收模型研究了脂質(zhì)制劑的腸道吸收規(guī)律，進(jìn)一步深入了脂質(zhì)制劑的腸道轉(zhuǎn)運(yùn)研究，對(duì)脂質(zhì)制劑的進(jìn)一步研究發(fā)展有重要的科學(xué)意義和應(yīng)用價(jià)值。