DLK1調(diào)控Notch信號通路對T-ALL細(xì)胞的影響.pdf

1、目的：通過檢測外源性DLK1（Delta-like1homolog）蛋白作用后急性T淋巴細(xì)胞白血病(Tcellacutelymphoblasticleukemia，T-ALL)細(xì)胞株CCRF-CEM細(xì)胞的增殖情況及Notch信號通路下游靶基因的表達(dá)水平，探討DLK1對CCRF-CEM細(xì)胞中Notch信號通路的作用及對CCRF-CEM細(xì)胞增殖的影響。在DLK1蛋白刺激后的CEM細(xì)胞中加入硼替佐米，檢測CEM細(xì)胞的生長抑制情況及Notch信

2、號通路下游靶基因表達(dá)水平的下調(diào)程度，進(jìn)一步證實DLK1通過調(diào)控Notch信號通路促進(jìn)T-ALL細(xì)胞的增殖。
　　方法：
　　1.采用CCK-8法檢測不同濃度外源性DLK1蛋白對CCRF-CEM細(xì)胞增殖活性的影響；采用RT-PCR法檢測DLK1蛋白作用后不同時間點CEM細(xì)胞中Notch信號通路的Notch1受體的mRNA表達(dá)水平及其下游靶基因的mRNA表達(dá)水平。
　　2.采用CCK-8法檢測硼替佐米對DLK1蛋白刺激后的

3、CCRF-CEM細(xì)胞增殖活性的影響；采用RT-PCR法檢測硼替佐米對DLK1蛋白作用后CEM細(xì)胞中Notch信號通路的Notch1受體的mRNA表達(dá)水平及其下游靶基因的mRNA表達(dá)水平的影響。
　　結(jié)果：
　　1.DLK1蛋白促進(jìn)CEM細(xì)胞增殖，同時引起Notch信號通路的Notch1受體的mRNA表達(dá)水平及其下游靶基因Hes1、c-myc、NF-κB的mRNA表達(dá)水平上調(diào)，與對照組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　2.硼替

4、佐米對實驗組與對照組細(xì)胞的增殖活性均有抑制作用，對實驗組與對照組細(xì)胞Notch1受體的mRNA表達(dá)水平及其下游靶基因Hes1、c-myc、NF-κB的mRNA表達(dá)水平均有抑制作用；而且對實驗組的抑制作用更明顯，與對照組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)論：
　　1.外源性DLK1蛋白可以通過上調(diào)Notch1受體及下游靶基因Hes1、c-myc、NF-κB促進(jìn)T-ALL細(xì)胞的增殖，提示DLK1可以通過調(diào)控Notch信號通路促進(jìn)T-