大豆異黃酮對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷后腦組織NF-kB和TNF-α表達(dá)的影響.pdf

1、目的：觀察大豆異黃酮（Soybean isoflavone，SI）對(duì)大鼠全腦缺血再灌注損傷腦組織NF-кB和TNF-α表達(dá)的影響，探討SI對(duì)大鼠全腦缺血再灌注損傷的影響及其可能機(jī)理。
　　方法：健康雄性 Sprage-Dawley（SD）大鼠50只隨機(jī)分為5組：假手術(shù)組（S組，n=10只），缺血再灌注組（IR組，n=10只），缺血再灌注+SI低劑量組（IR-L-SI組，n=10，60mg/kg bw.d），缺血再灌注+SI中劑量組

2、（IR-M-SI組，n=10，120mg/kg bw.d），缺血再灌注+SI高劑量組（IR-H-SI組，n=10，240mg/kg bw.d），S組和IR組大鼠每天用生理鹽水灌胃；灌胃周期21天，于第22天手術(shù)，術(shù)前一天停止給予飲食。S組只做手術(shù)，并在腦電圖下動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)120min，其余各組參照三血管阻斷法在腦電圖監(jiān)護(hù)下建立大鼠全腦缺血再灌注模型，全腦缺血60min，再灌注60min，所有模型成功的大鼠試驗(yàn)結(jié)束后20％烏拉坦腹腔注射處死，

3、斷頭取腦，左側(cè)大腦皮層速于-20℃冰箱保存用于測(cè)定生化指標(biāo)NO含量、TNOS及iNOS活性、SOD活性、MDA含量。取左側(cè)大腦皮層約100mg腦組織速至-80℃冰箱保存，RT-PCR法檢測(cè)NF-кBp65 mRNA。右側(cè)腦組織放入10%的福爾馬林固定，距額極2.5mm處向后切取2.0mm腦組織，制成石蠟切片，HE染色觀察腦組織形態(tài)變化，免疫組化法檢測(cè)NF-kB和TNF-α的表達(dá)。
　　結(jié)果：（1）腦組織病理學(xué)檢查：IR組大鼠腦神經(jīng)

4、細(xì)胞及膠質(zhì)細(xì)胞均腫脹，變性，胞膜不清，胞核固縮，神經(jīng)纖維網(wǎng)空泡樣改變，間質(zhì)水腫明顯，細(xì)胞及血管周圍間隙增大。與IR組相比，各用藥組的大鼠腦組織病變均明顯改善，胞核固縮減輕，細(xì)胞及血管周圍間隙明顯變窄，間質(zhì)疏松減輕。
　?。?）SI對(duì)大鼠全腦缺血再灌注損傷的SOD活性及MDA含量的影響：IR組SOD活性明顯低于S組（P<0.01），各用藥組較IR組均有升高，差異顯著， IR-M-SI組及 IR-H-SI組（P<0.01），IR-L-

5、SI組（P<0.05）,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。IR組MDA含量明顯高于S組（P<0.01），各用藥組較IR組均有降低，IR-L-SI組、IR-M-SI組（P<0.01），有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。SI對(duì)大鼠全腦缺血再灌注損傷的NO含量、TNOS及iNOS活性的影響：IR組NO含量明顯高于S組（P<0.01），各用藥組較IR組均有降低，差異顯著，IR-L-SI組及IR-M-SI組（P<0.01），IR-H-SI組（P<0.05），有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。IR組TNOS

6、及iNOS活性明顯高于S組（P<0.01）,各用藥組較IR組均有降低（P<0.01），有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　?。?）大鼠腦組織切片示：IR組NF-κB、TNF-α陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目較S組明顯升高（P<0.01），SI用藥組表達(dá)NF-κB、TNF-α陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目均減少，較IR組差異顯著（P<0.01）。NF-кB在半定量分析RT-PCR中可見(jiàn)SI各用藥組亮度減弱。
　　結(jié)論：1.腦組織NO含量增加，TNOS、iNOS活性升高，SOD活性