大豆異黃酮對(duì)大鼠全腦缺血再灌注后神經(jīng)元的保護(hù)作用及其機(jī)理探討.pdf

1、目的：1.觀察大豆異黃酮（soybean isoflavone,SI）對(duì)大鼠全腦缺血再灌注后神經(jīng)元的保護(hù)作用及其機(jī)理探討。
　　方法：60只健康成年雄性Sprague-Dawley大鼠，隨機(jī)分為3組：假手術(shù)組（Sham group，n=20），缺血再灌組(I/R group，n=20)，大豆異黃酮預(yù)處理組（SI group， n=20），大豆異黃酮預(yù)處理組給予SI灌胃，按劑量120 mg/kg，每天一次，灌胃21天，其他兩組用等體

2、積的0.9％生理鹽水連續(xù)灌胃21天，均于第22天進(jìn)行手術(shù)。制作全腦缺血再灌注損傷模型，即夾閉雙側(cè)頸總動(dòng)脈及基底動(dòng)脈1h,以腦電圖幾秒內(nèi)變?yōu)橐粭l直線作為全腦缺血模型成功的標(biāo)志。缺血1h后松夾，再灌注1h；假手術(shù)組僅手術(shù)(暴露和分離血管)不予缺血；各組實(shí)驗(yàn)的全過程中動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)腦電圖變化。光鏡下觀察各組大腦皮層組織病理形態(tài)學(xué)變化。用半定量RT-PCR法檢測(cè)皮層腦組織中CytochromeC mRNA、Caspase-9 mRNA、Caspase

3、-3 mRNA表達(dá)。免疫組織化學(xué)法測(cè)定腦組織中CytochromeC蛋白、Caspase-9蛋白、
　　Caspase-3蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果：1、在光鏡下觀察大腦皮質(zhì)區(qū)的病理形態(tài)學(xué)變化：假手術(shù)組:神經(jīng)元數(shù)量豐富，突起明顯，結(jié)構(gòu)完整，核膜清晰，核仁大;模型組:損傷嚴(yán)重，腦組織排列紊亂,細(xì)胞正常結(jié)構(gòu)消失，可見神經(jīng)元變性，大量片狀壞死伴嚴(yán)重水腫,核固縮,呈強(qiáng)嗜堿性,染色質(zhì)濃縮,伴神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞增生;SI組:損傷減輕，水腫程度減輕

4、，在一定程度上神經(jīng)元結(jié)構(gòu)和數(shù)量有所恢復(fù)。
　　2、半定量RT-PCR檢測(cè)結(jié)果顯示：假手術(shù)組腦組織CytochromeC mRNA、Caspase-9 mRNA、Caspase-3 mRNA表達(dá)較低；缺血再灌組的表達(dá)顯著增加（P<0.05）；大豆異黃酮預(yù)處理組的表達(dá)較再灌組相比明顯降低（P<0.05）。
　　3、免疫組化檢測(cè)結(jié)果顯示：假手術(shù)組細(xì)胞漿內(nèi)僅見少量的CytochromeC蛋白、Caspase-9蛋白、Caspase-

5、3蛋白表達(dá);與假手術(shù)組比較，再灌組細(xì)胞漿內(nèi)CytochromeC蛋白、Caspase-9蛋白、Caspase-3蛋白表達(dá)明顯增高（P<0.05）。與再灌組相比，大豆異黃酮組胞漿內(nèi)CytochromeC蛋白、Caspase-9蛋白、Caspase-3蛋白表達(dá)明顯降低（P<0.05）。
　　結(jié)論：1、SI對(duì)大鼠全腦缺血再灌后神經(jīng)元的凋亡有抑制作用。
　　2、SI可能通過抑制線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔（mitochondrial perm