過氧乙酸對鮑曼不動桿菌消毒滅菌作用的實驗研究.pdf

1、觀察消毒劑過氧乙酸(PAA)對鮑曼不動桿菌(A．baumannii)消毒后的活菌培養(yǎng)計數(shù)，探討該消毒劑對A．baumannii的殺菌效果，同時過氧乙酸可能的殺菌機制。 材料和方法:采用實驗室貯存的鮑曼不動桿菌，將其制成菌懸液，先用細菌濃度比濁測定法粗測其含菌濃度，然后以稀釋液稀釋至1×108 cfu／ml～5×108cfu／ml。3％牛血清白蛋白組54株鮑曼不動桿菌，0.3％牛血清白蛋白組8株鮑曼不動桿菌。采用二元包裝過氧乙酸溶

2、液，A液和B液以10：8(體積比)混勻，密閉放置24小時、48小時、72小時分別用碘量法測定其濃度，用無菌硬水配制過氧乙酸稀溶液。參照消毒技術(shù)規(guī)范進行中和劑鑒定實驗，選擇3g/l硫代硫酸鈉+10g/l吐溫-80作為中和劑。取消毒試驗用試管，先加入0.5ml鮑曼不動桿菌懸液，再加入0.5ml有機干擾物(0.3％牛血清白蛋白，3％4牛血清白蛋白)，置20℃±1℃水浴中5min后，用無菌吸管吸取過氧乙酸4.0ml注入其中，迅速混勻并立即計時，

3、待作用至預(yù)定時間，用數(shù)字可調(diào)移液器吸取0.5ml上述混合液加入4.5ml經(jīng)滅菌的中和劑中，混勻作用10min后，吸取1.0ml樣液加于無菌培養(yǎng)皿中(每管樣液接種2個培養(yǎng)皿)，將冷至40℃～45℃的胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基15ml傾注于已加入樣液的培養(yǎng)皿中。待瓊脂凝固后，置37℃的溫箱內(nèi)培養(yǎng)48小時，計數(shù)菌落數(shù)。試驗分為3個過氧乙酸濃度組：0.005％(50mg/l)，0.01％(100mg／l)，0.02％(200mg/l)以及5個作用時

4、間(1min，3min，5min，15min，30min)。同時設(shè)立對照組：用稀釋液代替消毒液，進行平行試驗，作為陽性對照，所得結(jié)果代表菌液原有濃度，以作為計算殺滅對數(shù)的初始濃度。試驗均重復(fù)3次，計算各組的活菌濃度(cfu/ml)。結(jié)果1、過氧乙酸的含量：過氧乙酸A液和B液以10：8(體積比)混勻，密閉放置24小時、48小時、72小時后其含量分別為182g/l、194g/l、188g/l。 2、中和劑鑒定試驗：采用0.02％過氧

5、乙酸和3％牛血清白蛋白，中和劑3g／l硫代硫酸鈉+10g/l吐溫-80，第1組無細菌，第2組菌落數(shù)158 cfu／ml，第3組菌落數(shù)56625000 cfu／ml，第4組菌落數(shù)57292000 cfu／ml，第5組菌落數(shù)60080000 cfu／ml，第6組無菌生長，第3、4、5組的組間菌落數(shù)誤差率為2.4％。 3、3％牛血清白蛋白作為有機干擾物的各試驗組的比較：三種濃度過氧乙酸殺菌效果有顯著差異(P<0.01)；0.005％過

6、氧乙酸與0.01％過氧乙酸殺菌效果比較：0.01％過氧乙酸明顯增高(P<0.01)；0.005％過氧乙酸與0.02％過氧乙酸殺菌效果比較：0.02％過氧乙酸明顯增高(P<0.01)；0.01％過氧乙酸與0.02％2±氧乙酸殺菌效果比較：0.02％過氧乙酸明顯增高(P<0.01)。 4、0.3％牛血清白蛋白作為有機干擾物的各試驗組的比較：三種濃度過氧乙酸殺菌效果有顯著差異(P<0.01)；0.005％過氧乙酸與0.01％過氧乙酸殺

7、菌效果比較無明顯差異(P>0.05)；0.02％過氧乙酸的殺菌效果明顯比0.005％過氧乙酸增高(P<0.01)；0.01％過氧乙酸與0.02％過氧乙酸殺菌效果比較：0.02％過氧乙酸明顯增高(P<0.O1)。 5、3％牛血清白蛋白和0.3％牛血清白蛋白有機干擾物作用下的殺菌效果的比較：0.005％過氧乙酸的殺菌效果，3％牛血清白蛋白組明顯低于0.3％牛血清白蛋白組(P<0.01)；0.01％過氧乙酸的殺菌效果，3％牛血清白蛋白

8、組與0.3％牛血清白蛋白組無明顯差異(P>0.05)；0.02％過氧乙酸的殺菌效果，3％牛血清白蛋白組與0.3％4匕血清白蛋白組比較無明顯差異(P>0.05)。結(jié)論1、過氧乙酸濃度0.005％～0.02％范圍內(nèi)，隨著濃度的提高，滅菌效果逐漸增高。 2、對醫(yī)院物品和器械進行消毒時選擇0.01％過氧乙酸作用5分鐘或0.02％過氧乙酸作用1分鐘可達到滿意滅菌效果；0.01％過氧乙酸作用10分鐘或0.02％過氧乙酸作用5分鐘可達到滅菌狀