CYP4F2、CYP4A11及LTC4S基因多態(tài)與缺血性腦卒中相關(guān)性研究.pdf

1、目的：
　　 腦卒中是嚴(yán)重危害人類健康的常見病、多發(fā)病,是人類三大死亡因為之一。研究已經(jīng)證實,高血壓、糖尿病、血脂異常、吸煙、飲酒、肥胖等一些傳統(tǒng)危險因素與腦卒中的發(fā)生有關(guān)。此外,遺傳學(xué)研究表明腦卒中的發(fā)生有其遺傳易感性。腦卒中是遺傳和環(huán)境因素共同作用的結(jié)果,遺傳因素在腦卒中的發(fā)病中起著重要作用,因此,尋找腦卒中的易感基因,從分子水平認(rèn)識其發(fā)病機(jī)制,從而提高對該病的預(yù)防,診斷及治療。
　　 花生四烯酸(arachidon

2、ic acid,AA)是人體內(nèi)最為豐富的物質(zhì)之一,是人體內(nèi)多種重要心血管活性物質(zhì)的前體。CYF4F2(cytochrome P450,family 4,subfamilyF,polypeptide 2)以及CYP4A11(cytochrome P450,family 4,subfamily A,polypeptide 11)是細(xì)胞色素P450家族成員之一,它們的主要功能是催化花生四烯酸生成20-羥二十烷四烯酸(20-hydroxyeic

3、osatetraenoic acid,20-HETE),20-HETE在調(diào)節(jié)腎、腦、骨骼肌和腸系膜動脈血管平滑肌肌源性收縮中發(fā)揮重要作用,此外20-HETE還具有調(diào)節(jié)血壓的作用。近來研究報道,20-HETE能引起出血性腦卒中后血管痙攣,參與缺血性腦卒中的發(fā)生發(fā)展過程。CYP4F2和CYP4A11是催化花生四烯酸生成20-HETE的主要合成酶。近來證實,CYP4F2基因的一個單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymo

4、rphism,SNP)rs2108622會導(dǎo)致花生四烯酸生成20-HETE減少。本研究的目的之一是應(yīng)用病例對照的方法研究CYP4F2和CYP4A11基因多態(tài)與缺血性腦卒中(Ischemic stroke,IS)的關(guān)系。
　　 白三烯C4合成酶(1eukotriene C4 synthase,LTC4S)是半胱酰白三烯合成通路中一個重要的酶,半胱酰白三烯是很強的炎癥介質(zhì),廣泛參與多種炎癥病理過程,半胱氨酰白三烯能通過激活其受體半胱

5、酰自三烯受體1(cysteinyl leukotrienereceptor 1,CysTL1)和半胱酰白三烯受體2(cysteinyl leukotriene receptor 2,CySTL2),改變內(nèi)皮細(xì)胞通透性以及血管內(nèi)皮細(xì)胞的遷移,介導(dǎo)平滑肌痙攣、微血管滲漏等。近年研究表明白三烯(leukotriene,LTs)與動脈粥樣硬化及增加心血管疾病患病率有關(guān)。本研究的另一目的就是應(yīng)用病例對照的方法研究LXC4S基因多態(tài)與缺血性腦卒中的

6、關(guān)系。
　　 方法：
　　 采用病例-對照研究方法,缺血性腦卒中(Ischemic stroke,IS)組選取中國北方IS患者302例,男性193例、女性109例,年齡在40-80歲間,均為漢族,無親緣關(guān)系；選取性別、年齡與IS組相匹配的健康個體350例作為對照組,男性212例、女138例；在此基礎(chǔ)上將IS組按病因不同分為大血管組(血栓性腦梗死組)和小血管組(腔隙性腦梗死組)。應(yīng)用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng).限制性片段長度多態(tài)性(P

7、CR-RFLP)的方法檢測CYF4F2基因rs2108622、rs3093100、rs3093105、rs3093135位點,CYP4A11基因rs9333025位點和LTC4S基因rs730012位點的多態(tài)性,應(yīng)用基質(zhì)輔助激光解吸附電離飛行時間質(zhì)譜法(MALDI-TOF)檢測rs3776924、rs1558139位點多態(tài)性；基因分型結(jié)果經(jīng)雙脫氧末端終止測序法進(jìn)一步確認(rèn)。用擬合優(yōu)度x2檢驗驗證每個位點SNP基因型在抽樣群體中的分布是否符

8、合Hardy-Weinberg平衡。對于單位點的SNP數(shù)據(jù),采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件x2 Fisher's精確概率法檢驗其基因型、等位基因型在對照組與IS組及各亞組中的頻率分布差異、風(fēng)險度分析,最后結(jié)合臨床資料,對相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行條件Logistic回歸方法排除傳統(tǒng)混雜因素的干擾,以P<0.05為檢驗水準(zhǔn)。用Shesis在線軟件計算CYF4F2基因單倍型的頻率。用UNPHASED軟件分析CYF4F2基因、CYP4A11基因?qū)S的聯(lián)合作

9、用。
　　 結(jié)論：
　　 1、CYP4F2基因rs2108622位點GG基因型可能是中國北方漢族人群男性缺血性卒中的獨立的危險因素,G等位基因可以增加男性患缺血性腦卒中的遺傳易感性。
　　 2、CYP4F2基因rs3093100、rs3093105、rs3093135以及rs1558139位點的基因多態(tài)性與缺血性腦卒中無關(guān)。
　　 3、CYP4F2基因的GGGT單倍型可能是IS的風(fēng)險單倍型。