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文檔簡介
1、目的:通過原代培養(yǎng)SD大鼠的乳鼠心室肌細(xì)胞并建立心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧模型,以模擬在體心肌缺血/再灌注損傷,觀察脂聯(lián)素在缺氧/復(fù)氧心肌細(xì)胞中的表達(dá)情況以及影響因素,并探討其意義。方法:采用胰蛋白酶消化法,結(jié)合差速貼壁法培養(yǎng)心肌細(xì)胞,并通過α-肌動蛋白免疫熒光法進(jìn)行細(xì)胞鑒定,選用培養(yǎng)72小時(shí)的單層心肌細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。①實(shí)驗(yàn)分組:正常對照組,羅格列酮組,缺氧/復(fù)氧組,羅格列酮+缺氧/復(fù)氧組。②實(shí)驗(yàn)評估:在倒置相差顯微鏡下觀察心肌細(xì)胞形態(tài)及自發(fā)搏動
2、情況,用RT-PCR法檢測心肌細(xì)胞脂聯(lián)素mRNA和心肌細(xì)胞膜上脂聯(lián)素受體R1及R2mRNA的表達(dá)。結(jié)果:①脂聯(lián)素mRNA表達(dá):羅格列酮組明顯高于正常對照組(P值<0.05),缺氧/復(fù)氧組明顯低于正常對照組(P值<0.05),羅格列酮+缺氧/復(fù)氧組明顯高于缺氧/復(fù)氧組(P值<0.05),羅格列酮+缺氧/復(fù)氧組與正常對照組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。②脂聯(lián)素受體mRNA表達(dá):羅格列酮組明顯高于正常對照組(P值<0.05),缺氧/復(fù)氧組明顯低于正常對照組(
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