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文檔簡介
1、目的:通過觀察丙酮酸乙酯對膿毒癥大鼠高遷移率族蛋白B1(highmobilitygroupproteinbox-1,HMGB1)表達的影響,為進一步揭示丙酮酸乙酯對膿毒癥的治療機制提供依據(jù)。
方法:將96只健康雄性SD大鼠隨機分為4組:假手術組(n=24)、膿毒癥組(n=24)、低劑量丙酮酸干預組(后稱LET組,n=24,)和丙酮酸乙酯干預組(后稱ET組,n=24)。假手術組開腹輕擾腸管后關腹,膿毒癥組、LET組、ET組均采用
2、盲腸結扎穿刺法(cecalligationpuncture,CLP)復制膿毒癥大鼠模型。LET組(20mg/kg大鼠體重)及ET組(40mg/kg大鼠體重)即刻予EP注射液腹腔內(nèi)注射4ml,每6小時重復注射一次,直至實驗結束,假手術組及膿毒癥組在相同時間用相同劑量的生理鹽水腹腔內(nèi)注射。各實驗組分別于術后2h、8h、24h、48h隨機處死6只大鼠,經(jīng)腹主動脈取血,離心取上清,用酶聯(lián)免疫法(ELISA)測定血漿HMGB1、TNF-α和IL-
3、6的表達水平。于術后24h取處死大鼠的末端回腸組織,用HE染色法觀察回腸的病理變化,用免疫組織化學方法檢測HMGB1蛋白的表達水平,用RT-PCR法檢測回腸組織HMGB1mRNA表達水平。
結果:
1、腸組織病理改變:假手術組病理損傷及炎癥改變輕微。與假手術組相比,膿毒癥組的病理損傷及炎癥改變明顯加重,而LET及ET組病理損傷及炎癥改變較膿毒癥組明顯減輕,但兩者之間未見有明顯差異。
2、血漿TNF-α、IL
4、-6變化:假手術組在術后各個時間點一直維持在較低水平,無顯著差異(P>0.05)。膿毒癥組、LET組和ET組中血漿TNF-α、IL-6水平在術后8h達到峰值,在術后24h及48h有逐步下降趨勢,各時間點之間有顯著差異(P<0.01)。與假手術組相比,膿毒癥組在術后2h、8h、24h、48h顯著增高(P<0.01)。與膿毒癥組相比,LET組、ET組在術后2h、8h顯著降低(P<0.01),ET組較LET組顯著降低(P<0.01)。
5、 3、血漿HMGB1變化:假手術組在術后各個時間點一直維持在較低水平,無顯著差異(P>0.05)。膿毒癥組、LET組、ET組在術后8h開始升高,于術后24h達到高峰值,在術后48h有所下降但仍維持在較高水平,各時間點之間有顯著差異(P<0.01)。與假手術組相比,
膿毒癥組在術后8h、24h、48h顯著增高(P<0.01)。與膿毒癥組相比,LET組、ET組在術后24h、48h顯著降低(P<0.01)。在術后24h,ET組較L
6、ET組顯著降低(P<0.01),而在術后48h,ET組較LET組顯著升高(P>0.05)。
4、腸組織HMGB1蛋白及HMGB1mRNA水平的變化:與假手術組相比,膿毒癥組、LET組、ET組在術后24h顯著增高(P<0.01)。與膿毒癥相比,LET組、ET組在術后24h顯著降低(P<0.01)。與LET組相比,ET組的HMGB1蛋白表達明顯下降(P<0.05),而LET組與ET組的HMGB1mRNA表達未見有明顯差異(P>0.
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