熱應(yīng)激對牛體細胞克隆胚胎早期發(fā)育的影響.pdf

1、選取西安本地屠宰場牛卵母細胞，通過對成熟前卵母細胞進行不同溫度熱應(yīng)激處理(對照組38.5℃，組2 39.5℃，組3 40.5℃，組4，41.5℃，組5 42.5℃)，比較重構(gòu)胚的卵裂率，囊胚率，并對不同供體細胞形成的克隆胚囊胚細胞數(shù)目進行比較，研究短時間(30min)熱應(yīng)激對核移植后重構(gòu)胚發(fā)育的影響。對未采取熱應(yīng)激措施卵母細胞形成的克隆胚分別在單細胞階段和桑椹胚階段：(1)以溫度高低為標(biāo)準(zhǔn)(分組同上試驗)進行30 min熱應(yīng)激處理，統(tǒng)計

2、囊胚發(fā)育率；(2)以高于對照組溫度2℃的溫度熱處理30min，1h，2h，統(tǒng)計囊胚發(fā)育率。研究熱應(yīng)激強度對胚胎的損傷影響。 結(jié)果表明： 1.卵母細胞41.5℃下30min的熱應(yīng)激，與對照組相比，卵裂率以及囊胚率都有顯著提高(P<0.05)。但是42.5℃組，雖然卵裂率有所提高，囊胚率與對照組相比卻顯著降低(P<0.05)。 2.用三種不同供體細胞分別進行核移植。發(fā)現(xiàn)熱應(yīng)激卵母細胞形成的克隆胚與未熱應(yīng)激的卵母細胞形

3、成的克隆胚相比，在囊胚細胞數(shù)上無顯著差異(P>0.05)。說明熱應(yīng)激不會影響胚胎的質(zhì)量，并且這一結(jié)果與供體細胞的種類無關(guān)。 3.對單細胞克隆胚進行30min熱應(yīng)激發(fā)現(xiàn)，隨著應(yīng)激溫度的升高，克隆胚胎的卵裂率與對照組相比沒有明顯負效應(yīng)(P>0.05)，而囊胚發(fā)育率確逐漸降低，相比對照組，從41.5℃組開始有顯著負效應(yīng)(P<0.05)。 4.對桑椹克隆胚進行30min熱應(yīng)激發(fā)現(xiàn)，隨著應(yīng)激溫度升高，囊胚發(fā)育率呈下降趨勢，42.5