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文檔簡介
1、為了了解牛早期胚胎發(fā)育的分子機(jī)制,建立牛胚胎在早期發(fā)育的特定階段基因表達(dá)變化的模式,探討體外胚胎發(fā)育的分子機(jī)理,進(jìn)行了以下方面的研究:
首先,通過體外受精的方法獲得體外培養(yǎng)的牛早期胚胎,以8細(xì)胞胚胎和囊胚為實(shí)驗(yàn)材料,利用單個(gè)胚胎mRNA差異顯示方法,篩選在牛體外培養(yǎng)胚胎中8細(xì)胞期胚胎和囊胚表達(dá)不同的基因片段,共篩選到11條差異表達(dá)的片段。將這些片段的測序結(jié)果與GenBank比對(duì),發(fā)現(xiàn)有7個(gè)片段與已知的功能基因或調(diào)控基因序列
2、具有較高的相似性,這些基因分別為CALM1、HMG2L1、IK、INAR、RPL31、RIMS2和TRM112L基因;一條片段為未知功能基因,另外3條片段在GenBank中無相似序列。
為了鑒定差異顯示法所檢測到的基因片斷,采用RT-PCR法檢測了篩選到的7個(gè)功能基因在早期胚胎中的表達(dá)情況,結(jié)果表明:在牛8細(xì)胞胚胎和囊胚中未能檢測到HMG2L1、IK的mRNA表達(dá);而CALM1、LYAR、RIMS2、RPL31、TRM11
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