茶多酚與亞硒酸鈉的抗氧化作用對(duì)酒精性肝病的影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：本課題采用大鼠酒精灌胃的方法建立酒精性肝病(ALD)早期病變動(dòng)物模型，建模同時(shí)加以茶多酚、亞硒酸鈉抗氧化劑干預(yù)。通過(guò)血清肝臟酶學(xué)、脂質(zhì)過(guò)氧化指標(biāo)檢測(cè)、石蠟切片觀察評(píng)價(jià)、電鏡超微結(jié)構(gòu)檢查、半定量RT-PCR、ELISA、免疫組化等實(shí)驗(yàn)方法綜合評(píng)價(jià)各組動(dòng)物病變情況及相關(guān)指標(biāo)。探討茶多酚抗氧化作用對(duì)ALD的治療可能的機(jī)制；以及亞硒酸鈉對(duì)ALD病變影響并分析可能的原因。 方法：42只雌性Wistar大鼠隨機(jī)分為四組：對(duì)照組、模型組

2、、亞硒酸鈉干預(yù)組、茶多酚干預(yù)組。以55度紅星牌二鍋頭白酒加2g/kg/d的玉米油灌胃的方式建模。酒精劑量8ml-15ml/kg/d．每周遞增，兩干預(yù)組建模同時(shí)加以茶多酚(0.25g/kg/d)及亞硒酸鈉(0.4mg/kg/d)干預(yù)病變進(jìn)程。實(shí)驗(yàn)達(dá)七周時(shí)采取下腔靜脈血分離血清，檢測(cè)AST、ALT、MDA水平。肝組織石蠟切片HE染色結(jié)合蘇丹Ⅳ特染觀察脂變、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、肝細(xì)胞細(xì)胞壞死及纖維化情況。透射電鏡觀察模型組、茶多酚干預(yù)組肝細(xì)胞線粒體

3、、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、脂滴產(chǎn)生等超微結(jié)構(gòu)改變。肝組織半定量RT-PCR、血清ELISA法、肝組織免疫組化檢測(cè)TNF-α表達(dá)，免疫組化檢測(cè)肝組織內(nèi)Caspase-3的表達(dá)情況。 結(jié)果：1．模型組與對(duì)照組血清及形態(tài)學(xué)檢查顯示造模成功且二組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，ALD模型成功。2．茶多酚干預(yù)組與模型組比較：茶多酚干預(yù)組肝小葉內(nèi)脂滴減少，組織學(xué)評(píng)分明顯低于模型組，P<0.05。AST絕對(duì)值低于模型組，P<0.05。ALT無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。MDA

4、絕對(duì)值低于模型組，P<0.05。TNF-α三種檢測(cè)方法結(jié)果絕對(duì)值均低于模型組，P<0.05。免疫組化Caspase-3面密度值與模型組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。P<0.05。TNF-α與Caspase-3的免疫組化相關(guān)性分析顯示二者直線相關(guān)。3．亞硒酸鈉干預(yù)組與模型組相比：脂變細(xì)胞明顯增多，但肝小葉內(nèi)肝細(xì)胞壞死、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)程度輕于模型組。AST、TNF-α檢測(cè)結(jié)果與模型組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。P>0.05。MDA、Caspase-3有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。