肺癌組織HLA-G的表達和血清IL-10、IFN-γ的變化及意義.pdf

1、背景： 支氣管肺癌絕大部分來源于各級支氣管上皮，正確命名應(yīng)為支氣管癌，簡稱肺癌，為最常見的肺部原發(fā)性惡性腫瘤。世界范圍內(nèi)的發(fā)病率和病死率都在急劇上升。在多數(shù)發(fā)達國家中占男性常見惡性腫瘤的首位。自1987年以來，美國女性死于肺癌的人數(shù)已超過乳腺癌，也已占常見腫瘤的首位。目前肺癌的治療尚缺乏理想的有效手段。 近些年來，隨著生物技術(shù)的進步，免疫治療再次成為熱點。對腫瘤免疫逃逸機理的研究有助于人們尋找和設(shè)計新的腫瘤免疫治療方法和

2、途徑。有研究證實機體對腫瘤的免疫應(yīng)答反應(yīng)處于低能狀態(tài)，從而使腫瘤逃避機體免疫監(jiān)視，這在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中起到重要作用。越來越多的研究證明，腫瘤細胞表達的人類白細胞抗原-G(HumanLeukocyte Antigen G，HLA-G)主要通過抑制機體免疫活性細胞的作用而在腫瘤免疫逃逸中發(fā)揮作用。HLA-G與一些免疫相關(guān)的細胞因子的相互作用及它對肺癌發(fā)生、發(fā)展過程的影響目前仍不清楚。為此我們設(shè)計了本實驗，以期明確HLA-G參與肺腫瘤免疫逃

3、逸的機制，為完善肺癌的免疫治療提供理論依據(jù)。 目的： 本研究擬探討肺癌患者腫瘤組織HLA-G的表達和外周血淋巴細胞亞群、血清IL-10、IFN-γ的變化，以進一步闡明HLA-G表達與肺癌患者臨床特征的關(guān)系，肺癌患者機體免疫狀況的變化，以及這一過程中IL-10、IFN-γ的改變與HLA-G表達的相互影響。 方法： 1、收集肺癌和對照組患者的肺組織及血液標(biāo)本。 2、小部分新鮮組織標(biāo)本勻漿后提取RNA，

4、用RT-PCR方法檢測HLA-G基因相對表達濃度。其他組織標(biāo)本固定后制作石蠟切片，常規(guī)染色確定腫瘤病理分型及分化程度；免疫組化SP法檢測組織標(biāo)本HLA-G抗原表達程度。 3、用流式細胞分析技術(shù)(FCM)檢測外周血淋巴細胞亞群相對計數(shù)，酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測外周血血清中IL-10和IFN-γ的濃度。 結(jié)果： 1、從新鮮肺組織中提取的總RNA經(jīng)RT-PCR反應(yīng)后，HLA-G引物的擴增產(chǎn)物肺癌組的陽性表達為

5、51.5％，對照組中表達為0，兩者之間比較有顯著差異(P＜0.01)。肺癌患者HLA-GmRNA陽性表達在不同性別、不同年齡、不同病理分型之間的差異不明顯(P＞0.05)，但在不同臨床分期及分化程度之間有差異(P＜0.01)。 2、HLA-G蛋白在肺癌組病理組織的陽性反應(yīng)物主要定位于細胞膜，呈棕黃色，陽性表達率45.4％，對照組組織中表達為0，兩者之間比較有顯著差異(P＜0.01)。肺癌患者HLA-G蛋白陽性表達在不同性別、不同

6、年齡之間的差異不明顯(P＞0.05)，但在不同病理分型、分化程度及臨床分期之間有差異(P＜0.05，P＜0.01.P＜0.01)。 3、外周血淋巴細胞亞群相對計數(shù)中的T淋巴細胞(CD3+/CD45+)、NK細胞(CD16+CD56+/CD45+)比率顯示：肺癌組較對照組降低(P＜0.01)，但在肺癌組織HLA-G蛋白表達陽性與陰性組織之間差異不明顯(P＞0.05)。 4、外周血血清中IL-10的含量在肺癌組較對照組明顯升

7、高(P＜0.01)，在肺癌組織HLA-G蛋白表達陽性的患者高于HLA-G蛋白表達陰性患者，外周血血清中IFN-γ的含量在肺癌組較對照組降低(P＜0.05)，在HLA-G蛋白表達陽性與陰性組織之間差異不明顯(P＞0.05)。 結(jié)論： HLA-G在肺癌組織中表達較對照組明顯上調(diào)。HLA-G表達與肺癌患者年齡、性別沒有關(guān)系。腫瘤病理類型對HLA-GmRNA表達基本沒有影響，但肺腺癌組織表達HLA-G抗原較其他類型肺腫瘤明顯增