腎移植術(shù)后抗HLA和MICA抗體在移植腎慢性排斥反應(yīng)中的臨床研究.pdf

1、由于新型免疫抑制劑的應(yīng)用、組織配型技術(shù)的發(fā)展，腎移植近期效果得到了顯著改善，目前尸腎移植1年存活率達(dá)90．0%以上，親屬供腎移植則可達(dá)到90．0%～95．0%的水平。雖然腎移植的近期效果有了很大的提高，腎移植遠(yuǎn)期效果改善并不明顯，移植物排斥反應(yīng)仍然是影響腎移植存活的一個(gè)主要問(wèn)題。腎移植術(shù)后慢性排斥反應(yīng)可引起移植物功能的緩慢喪失，常伴有蛋白尿和高血壓，其病因仍然不明確。移植物排斥反應(yīng)通常被認(rèn)為是T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的，但近年來(lái)的研究顯示，體液免

2、疫應(yīng)答機(jī)制在其中起到十分重要的作用。群體反應(yīng)性抗體（pannel reactive antibody，PRA）是患者通過(guò)移植、輸血、妊娠等接觸了人類主要組織相容性抗原（Major histocompatibility complex，MHC）而被致敏，產(chǎn)生的存在于外周血液的抗HLA抗體，與移植物急性排斥、慢性排斥、移植物功能延遲（Delayed graft function，DGF）、移植腎存活率密切相關(guān)。除抗HLA抗體，參與體液性排斥

3、反應(yīng)的同種抗體還有抗人類主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類相關(guān)鏈A抗原抗體（Anti-human major histocompatibility complex classⅠ chain-related A antibody，MICA）和抗血管內(nèi)皮細(xì)胞抗體（Anti-vascular endothelial cell antibody，AECA）、抗血管緊張素1類受體抗體（Anti-angiotensin type1 receptor anti

4、body）等非HLA抗體。超急性排斥反應(yīng)中抗體介導(dǎo)的移植物損傷即是典型的體液性排斥反應(yīng)。除參與超急性和急性排斥反應(yīng)外，抗移植物抗體還參與慢性體液性排斥反應(yīng)，引起腎小球基底膜增厚、腎小管萎縮及腎間質(zhì)纖維化，并出現(xiàn)特征性的動(dòng)脈血管病病變：移植腎小葉間動(dòng)脈分支內(nèi)膜明顯增生、增厚，動(dòng)脈管腔縮小、狹窄以至閉塞。供、受體HLA的不匹配是導(dǎo)致抗HLA抗體的主要原因。移植前進(jìn)行HLA配型已經(jīng)成為最根本的預(yù)防排斥手段之一。但研究發(fā)現(xiàn)，在HLA基因匹配的器

5、官移植中仍有部分病例出現(xiàn)輕重不等的排斥反應(yīng)，提示其它免疫因素亦參與移植物排斥。MICA基因?qū)儆诜墙?jīng)典HLA-I類樣分子，其組成、表達(dá)和產(chǎn)物與HLA-I類基因不同，包括多個(gè)不同的等位基因，其基因多態(tài)性雖不如經(jīng)典的HLA基因豐富，但亦很高。研究結(jié)果表明，多種器官移植受體內(nèi)M ICA抗體與移植后排斥反應(yīng)的發(fā)生具有密切的相關(guān)性。在腎臟移植的急、慢性排斥反應(yīng)中都有MICA蛋白表達(dá)的證據(jù)。本課題通過(guò)監(jiān)測(cè)腎移植受者移植前后的體液免疫狀態(tài)，探討抗HLA

6、抗體和抗MICA抗體與移植腎慢性排斥反應(yīng)的關(guān)系及其對(duì)移植物長(zhǎng)期存活的影響，以期為臨床移植腎慢性排斥的預(yù)測(cè)和治療提供理論基礎(chǔ)和臨床依據(jù)。 目的： 通過(guò)研究腎移植術(shù)后抗HLA抗體和MICA抗體與移植腎慢性排斥反應(yīng)的關(guān)系及抗體出現(xiàn)情況與移植腎遠(yuǎn)期功能的相關(guān)性，探討抗移植物抗體在慢性移植腎損傷中的作用及動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)抗HLA抗體和MICA抗體對(duì)改善移植腎長(zhǎng)期存活的臨床意義。 方法： 選擇在我院接受腎移植后長(zhǎng)期隨訪的60

7、例患者，男32例，女28例，年齡25～73歲，平均（45．3±10．8）歲，其中在2006年1月-2007年9月經(jīng)移植腎穿刺活檢確診（依照Banff2005標(biāo)準(zhǔn)）為慢性排斥反應(yīng)的34例患者設(shè)為慢性排斥組（CR組），同期手術(shù)移植腎功能穩(wěn)定的26例受者設(shè)為對(duì)照組。應(yīng)用One Lambda抗原板通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)受者腎移植前血清中的抗HLA抗體，于2007-01/07月檢測(cè)受者術(shù)后抗HLA抗體情況，對(duì)陽(yáng)性血清進(jìn)一步用抗原板

8、檢測(cè)抗體陽(yáng)性率及其特異性。采用Luminex免疫磁珠液相芯片技術(shù)檢測(cè)患者移植術(shù)后抗MICA抗體。觀察腎移植患者手術(shù)前后抗HLA抗體動(dòng)態(tài)變化及術(shù)后抗MICA抗體合成情況，回顧性分析比較兩組患者術(shù)前、術(shù)后抗HLA抗體、抗MICA抗體陽(yáng)性率（采用兩獨(dú)立樣本率比較的x2檢驗(yàn)），并分析比較不同抗體組患者術(shù)后1年、2年、3年時(shí)的血肌酐水平（采用重復(fù)測(cè)量數(shù)據(jù)的方差分析）。所有數(shù)據(jù)均采用SPSS13．0統(tǒng)計(jì)軟件分析，P≤0．05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

9、 結(jié)果： 1、慢性排斥組與腎功能正常組抗HLA抗體比較 移植腎慢性排斥反應(yīng)組患者術(shù)前抗HLA抗體陽(yáng)性者7例（20．6%），移植腎功能組穩(wěn)定組中術(shù)前抗HLA抗體陽(yáng)性者7例（26．9%），抗HLA抗體陽(yáng)性率高于慢性排斥組，但兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=0．331，P=0．565）。慢性排斥組患者術(shù)后抗HLA抗體陽(yáng)性16例（47．1%），腎功能組穩(wěn)定組只有3例（11．5%），兩組比較有顯著性差異（x2=8．591，p=

10、0．003）。慢性排斥組術(shù)前抗HLA抗體陰性27例，其中術(shù)后轉(zhuǎn)為陽(yáng)性10例（37．0%），腎功能組穩(wěn)定組術(shù)前抗HLA抗體陰性17例，其中術(shù)后轉(zhuǎn)為陽(yáng)性2例（10．5%），低于慢性排斥組，兩組比較有顯著性差異（x2=4．065，P=0．044）。 2、慢性排斥組與腎功能正常組抗MICA抗體比較 慢性排斥組中術(shù)后抗MICA抗體陽(yáng)性者16例（47．1%），移植腎功能組穩(wěn)定組中術(shù)后抗MICA抗體陽(yáng)性者僅5例（19．2%），兩組比較

11、差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=5．015，P=0．025）。慢性排斥組總抗體陽(yáng)性率（抗HLA/MICA抗體）為73．5%，移植腎功能穩(wěn)定患者只有30．8%出現(xiàn)抗體，兩組比較存在顯著性差異（x2=10．884，P=0．001）。 3、抗HLA抗體和抗MICA抗體對(duì)移植腎功能的影響 根據(jù)術(shù)后抗HLA抗體和抗MICA抗體情況分為以下四組：（1）抗HLA抗體陽(yáng)性，抗MICA抗體陰性，即HLA+/MICA-組；（2）抗HLA抗體陰性，抗

12、MICA抗體陽(yáng)性，即HLA-/MICA+組；（3）抗HLA抗體陽(yáng)性，抗MICA抗體陽(yáng)性，即HLA+/MICA+組；（4）抗HLA抗體陰性，抗MICA抗體陰性，即HLA-/MICA-組。采用重復(fù)測(cè)量數(shù)據(jù)的方差分析，不同抗體組術(shù)后血清肌酐水平存在顯著性差異（F=87．962，P=0．000），各組術(shù)后不同時(shí)間血清肌酐水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=8．210，P=0．000）。 結(jié)論： 1．移植術(shù)后抗HLA抗體的出現(xiàn)與移植腎慢性排