PRA、HLA抗體及MICA監(jiān)測腎移植術(shù)后排斥反應(yīng)的研究.pdf

1、群體反應(yīng)性抗體(panel reactive antibodies，PRA)是一種IgG類型的機體內(nèi)體液性免疫抗體，即群體反應(yīng)性抗HLA-IgG抗體，主要針對人類HLA抗原，特異性強。是否成為外科領(lǐng)域組織器官移植術(shù)前篩選致敏受者的重要指標(biāo)，與移植排斥反應(yīng)和存活率是否密切相關(guān)現(xiàn)已成為研究就熱點。由于人類白細胞抗原的多樣性，相應(yīng)的抗體種類也是多種多樣的。HLA供受者配型良好的排斥發(fā)生和促進移植腎功能的恢復(fù)較好，并可降低移植受者的致敏性，可以

2、使移植腎術(shù)后長期存活。有研究發(fā)現(xiàn)，一些免疫學(xué)因素(如群體反應(yīng)抗體和延長的冷缺血時間等)和非免疫學(xué)因素(移植腎延遲恢復(fù))可增加急性排斥反應(yīng)和降低移植。腎的長期存活。腎移植受者在接受了HLA不同的供腎后，體內(nèi)產(chǎn)生抗HLA抗體而成為致敏狀態(tài)。致敏不但與急性排斥有關(guān)，而且與慢性排斥及長期存活率也有關(guān)。研究顯示，在移植大鼠中抗HLA抗體能直接殺死移植后的組織細胞，能夠引起超排斥反應(yīng)、加速性排斥反應(yīng)、排斥反應(yīng)和排斥反應(yīng)，最終導(dǎo)致移植器官功能喪失移植

3、失敗。近年來，隨著。腎臟疾病增多，腎移植數(shù)量也隨之增多，2次移植也隨之逐步增加，曾經(jīng)有過妊娠史或輸血史的病人都可使受者體內(nèi)出現(xiàn)抗HLA抗體，則會產(chǎn)生較強的抗性，使該受者處于一種致敏狀態(tài)，不利于。腎臟移植配型。臨床腎移植術(shù)前，多采用患者與供者之間的淋巴毒交叉配型試驗，即供者淋巴細胞+受者血清+補體，以檢測受者血清內(nèi)是否存在有針對特定供者的淋巴細胞毒抗體。國外報告，抗供者淋巴細胞抗體陽性受者，移植后80％會發(fā)生超排斥反應(yīng)，所以此項檢查很大程

4、度上能夠避免移植術(shù)后超排斥反應(yīng)的發(fā)生，但這項檢查只能檢測受者血清內(nèi)針對供者特異的抗HLA抗體，不能檢測針對其他HLA的抗體，因此還有大部分患者發(fā)生移植失敗。研究表明，在HLA配型良好的情況下，針對多態(tài)性主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類相關(guān)鏈的MICA抗體，對移植腎排斥反應(yīng)、功能延遲、移植物切除、長期存活也有重要影響。移植前的淋巴細胞毒交叉配合試驗并不能檢測出抗MICA抗體?？筂ICA抗體產(chǎn)生的途徑尚未完全清楚，可能存在“天然”的致敏途徑。且抗M

5、ICA抗體可能包含IgM和IgG兩種免疫球蛋白類型。本文對入組患者進行MICA抗體檢測，前瞻性研究PRA、HLA、MICA抗體對腎移植后的影響。
　　 有研究表明，PRA的存在與排斥反應(yīng)，慢性血管排斥反應(yīng)和排斥反應(yīng)發(fā)生均有關(guān)系，PRA水平與預(yù)敏程度關(guān)系密切，移植后發(fā)生排斥反應(yīng)機會增高。腎移植受者的預(yù)致敏程度對移植物生存有顯著的影響，所以移植前檢測受者體內(nèi)的抗HLA抗體水平(測定PRA)能夠有效地選擇供者，提高移植腎的生存率。高P

6、RA是腎移植排斥反應(yīng)的免疫性高危因素，是否可以成為腎移植的預(yù)警監(jiān)測是本研究主要創(chuàng)新點，通過對入組患者的PRA數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析，探討群體反應(yīng)性抗體與腎移植術(shù)后排斥反應(yīng)、排斥反應(yīng)、移植腎功能延遲、移植失敗的關(guān)系及應(yīng)用意義。良好的PRA與HLA、MICA抗體篩選技術(shù)是。腎移植患者長期存活和術(shù)后恢復(fù)腎功能的有利條件，而PRA值的升高可直接直接造成移植腎的排斥反應(yīng)、功能延遲、移植失敗，檢測腎移植患者術(shù)前術(shù)后PRA，特別是確定高敏感移植受者體內(nèi)抗體的

7、性質(zhì)意義重大。本研究通過PRA與HLA、MICA抗體檢測了解腎移植受者的免疫排斥基礎(chǔ)因素，更好的預(yù)防治療腎移植術(shù)后的排斥反應(yīng)、功能延遲、移植失敗等情況。
　　 目的：
　　 1、研究PRA與HLA、MICA抗體篩選技術(shù)，確定切實可靠篩選項目及技術(shù)進行入組患者檢測。
　　 2、研究移植腎丟失前組織內(nèi)HLA與MICA抗體產(chǎn)生情況與PRA水平變化的關(guān)系
　　 3、研究PRA與HLA、MICA抗體對排斥反應(yīng)、移植

8、腎功能延遲、移植失敗的預(yù)測意義。
　　 4、研究PRA與HLA、MICA抗體檢測是否可作為臨床治療效果判定指標(biāo)。
　　 方法：
　　 1、選擇入組患者211例進行研究，按照術(shù)后6個月內(nèi)發(fā)生的排斥反應(yīng)、移植腎功能延遲、移植失敗，分層隨機化法隨機分為正常組、排斥反應(yīng)組、移植。腎功能延遲組、移植失敗組進行研究。
　　 2、采用ELISA法對外周血PRA進行檢測，對比PRA陽性、陰性患者排斥反應(yīng)、移植腎功能延遲、

9、移植失敗發(fā)生率。
　　 3、采用流式細胞儀檢測腎活檢組織PRA、HLA、MICA抗體。
　　 4、采用ELISA法檢測外周血HLA、MICA抗體。
　　 5、采用腎活檢技術(shù)對排斥反應(yīng)組、移植腎功能延遲組、移植失敗組患者進行組織學(xué)檢測。
　　 6、與其他中心合作，設(shè)定共同觀察樣本，共同完成本研究。
　　 7、觀察各組術(shù)前PRA、HLA、MICA抗體水平變化并進行比較。
　　 8、觀察術(shù)后6個

10、月內(nèi)各組PRA、HLA、MICA抗體水平進行比較。
　　 9、觀察排斥反應(yīng)組、移植腎功能延遲組、移植失敗組腎活檢組織中PRA、HLA、MICA抗體水平進行比較。
　　 10、統(tǒng)計學(xué)分析：GraphPad Prism統(tǒng)計分析軟件5.0對所有數(shù)據(jù)進行t檢驗或方差分析并進行多重比較，P<0.05表示具有顯著性差異。數(shù)值用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差或者標(biāo)準(zhǔn)誤表示，采用Spearman等級相關(guān)的方法，對PRA、HLA、MICA抗體水平進行相關(guān)

11、性分析。
　　 結(jié)果：
　　 1、術(shù)前211例患者出現(xiàn)PRA、HLA、MICA抗體例數(shù)比較(X2=3.55、3.21、3.22，P>0.05，無顯著性差異)。
　　 2、術(shù)前PRA陰性與陽性患者6個月內(nèi)發(fā)生排斥、移植腎功能延遲、切除移植腎比較(X2=5.22、5.33、5.65，P<0.05，具有顯著性差異)。
　　 3、術(shù)前PRA陰性與陽性患者PRA、HLA、MICA抗體之間水平關(guān)系比較(t=6.22、

12、7.33、6.65，P<0.05，具有顯著性差異)。
　　 4、排斥組、移植腎功能延遲組、切除移植腎比較組PRA、HLA、MICA抗體之間關(guān)系比較(t=6.45、6.65、6.89，P<0.05，具有顯著性差異)。
　　 5、術(shù)前PRA陽性組患者中PRA值在10-30％與PRA≥30％，術(shù)后排斥、延遲恢復(fù)、切除移植腎比較(X2=5.02、5.13、5.75，P<0.05，具有顯著性差異)。
　　 6、術(shù)前PRA陽

13、性組患者中PRA值在10-30％與PRA≥30％，PRA、HLA、MICA抗體之間水平關(guān)系比較(t=5.65、6.45、6.75，P<0.05，具有顯著性差異)。
　　 7、移植后PRA轉(zhuǎn)為陽性者與術(shù)后PRA仍為陰性的患者中術(shù)后排斥、延遲恢復(fù)、切除移植腎比較(X2=4.62、4.73、5.15，P<0.05，具有顯著性差異)。
　　 8、移植后PRA轉(zhuǎn)為陽性者與術(shù)后PRA仍為陰性的患者PRA、HLA、MICA抗體之間水平

14、關(guān)系比較(t=5.43、6.65、6.76，P<0.05，具有顯著性差異)。
　　 9、排斥組、移植腎功能延遲組、腎切除組PRA、HLA、MICA抗體與血清肌酐之間關(guān)系比較(t=6.21、7.87、8.94、8.21，P<0.05，具有顯著性差異)。
　　 10、各組間PRA、HLA、MICA抗體變化呈正相關(guān)(rs=0.614，P<0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1、術(shù)前檢測PRA、HLA、MICA抗體

15、具有重要臨床意義，尤其對有過手術(shù)、輸血、妊娠史的患者更有意義。
　　 2、PRA、HLA、MICA抗體的檢測，可準(zhǔn)確地預(yù)測和診斷排斥、移植腎功能延遲的發(fā)生。
　　 3、PRA檢測可作為臨床治療效果判定指標(biāo)。
　　 4、HLA與MICA抗體術(shù)可能是排斥的原因。
　　 5、PRA水平檢測可以作為腎移植排斥反應(yīng)的預(yù)警指標(biāo)。
　　 6、PRA、HLA、MICA抗體水平增高是腎移植術(shù)后排斥反應(yīng)發(fā)生和進展的相

16、關(guān)因素，參與腎移植術(shù)后排斥反應(yīng)。
　　 7、PRA與HLA、MICA抗體的水平呈正相關(guān)，因此PRA高表達患者易發(fā)生排斥及功能延緩或失功。
　　 8、推薦采用PRA與HLA、MICA抗體聯(lián)合檢測作為腎移植患者術(shù)前篩選。
　　 9、在移植后應(yīng)密切監(jiān)測PRA水平的變化，由此可以幫助臨床醫(yī)師準(zhǔn)確地預(yù)測和診斷急性排斥并在指導(dǎo)治療中發(fā)揮重要的作用，即能夠近早地采取抗排斥治療措施，更大程度上挽救移植腎的功能，提高移植成功率。<

17、br>　　 10、PRA抗體檢測對于預(yù)測移植物失功，此外，PRA抗體檢測結(jié)合血清肌酐更有意義。
　　 創(chuàng)新點：
　　 1、采用免疫組化ELISA法對外周血PRA、HLA、MICA抗體進行檢測。
　　 2、采用腎活檢技術(shù)進行組織學(xué)檢測
　　 3、采用流式細胞儀檢測腎活檢組織PRA、HLA、MICA抗體。
　　 4、采用ELISA法檢測外周血及腎活檢組織HLA、MICA抗體。
　　 5、探討