銀杏葉標準提取物對急性期梗死心肌移植骨髓間充質干細胞的保護作用.pdf

1、目的: 探討銀杏葉標準提取物EGB761（extract of Ginkgo Biloba，EGB761）對大鼠急性期梗死心肌（acute myocardial infarction，AMI）移植骨髓間充質干細胞（bone mesenchymal stem cells，BMSCs）的心肌微環(huán)境、移植BMSCs的存活、分化及心功能的影響。
　　 方法：建立大鼠MI模型，5-0醫(yī)用無損傷縫線結扎冠狀動脈左前降支(left anter

2、ior descending，LAD)上中1/3 交界處，以心電圖顯示ST段抬高和肉眼可見左心室前壁暗紫為模型制作成功。經心外膜下直接注射經PKH-26標記的SD大鼠BMSCs作為移植供體細胞（1×105cells）。
　　 將上述動物隨機分為兩組，A組：（EGB761處理組）細胞移植＋EGB761腹腔注射（100mg/kg.d）；B組：（對照組）：細胞移植＋生理鹽水腹腔注射（注射體積同EGB761處理組），每組15只。

3、　　 各組于術后1d、2d、7d取材。HE染色觀察心肌梗死區(qū)及邊緣區(qū)炎性細胞浸潤，酶促反應和氧化產物吸光度法檢測梗死心肌超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活性和氧化應激產物丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量，Western Blot法檢測組織中凋亡相關蛋白Fas表達、Tunel法檢測梗死心肌中移植細胞凋亡情況，免疫熒光雙標法觀察梗死心肌中移植細胞的分化，同時，測定給藥后大鼠心功能變化。

4、
　　 結果：
　　 1. HE染色觀察顯示，術后1d、2d、7d，實驗組梗死心肌組織炎癥細胞浸潤逐漸減輕，對照組梗死心肌組織炎癥細胞的浸潤則進行性加重；于術后相應的時間點，與對照組比較，實驗組中炎癥細胞浸潤明顯減輕，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。
　　 2. 酶促反應和氧化產物吸光度檢測結果顯示，術后1d、2d、7d，實驗組梗死心肌組織SOD活性逐漸升高，而對照組梗死心肌組織中SOD活性逐漸降低；于術后相應

5、的時間點與對照組比較，實驗組SOD活性顯著升高（P＜0.05）。
　　 術后1d、2d、7d，實驗組梗死心肌組織中MDA含量漸減少，對照組梗死心肌組織中MDA含量漸增多；于術后相應的時間點，與對照組比較，實驗組MDA含量明顯減少，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　 3. Fas蛋白檢測結果顯示，術后1d、2d、7d，實驗組Fas蛋白的表達逐漸減少，對照組Fas蛋白的表達逐漸增多；于術后相應時間點1d、2d、7d，與

6、對照組比較，實驗組Fas蛋白的表達明顯減少，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　 4. 移植的BMSCs凋亡比率測定結果，術后1d、2d、7d，兩組中移植的BMSCs凋亡比率漸增加；于術后相應時間點1d、2d、7d，與對照組比較，實驗組梗死心肌中BMSCs的凋亡比率明顯減少，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　 5. 移植的BMSCs分化檢測結果，實驗7d組BMSCs胞漿中有cTnI表達，而對照組BMSCs胞漿中

7、未見cTnI表達。
　　 6. 移植BMSCs心肌梗死大鼠的心臟功能測定結果，術后1d、2d、7d，實驗組左室±dp/dtmax逐漸增加，對照組中大鼠左室±dp/dtmax逐漸降低；于術后相應時間點1d、2d、7d，與對照組比較，實驗組左室±dp/dt增加，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　 結 論:
　　 1. EGB761可減輕急性期梗死心肌移植BMSCs心肌局部的炎癥及氧化應激反應，減少移植BMSCs