別隱品堿對兔缺血再灌注心臟跨室壁復(fù)極離散度的影響.pdf

1、背景:研究發(fā)現(xiàn),在心肌缺血再灌注期間,心外膜(epicardium,Epi)、中膜(midmyocardium,M)、內(nèi)膜(endocardium,Endo)心肌細(xì)胞的跨室壁復(fù)極異質(zhì)性明顯增大。三層心肌細(xì)胞電生理特性導(dǎo)致跨室壁復(fù)極離散度(transmural repolarization dispersion TDR)增大被認(rèn)為是導(dǎo)致缺血/再灌注心律失常的重要機(jī)制之一。別隱品堿(allocryptoine ALL)具有與許多抗心律失常中

2、藥成分相似的異喹啉結(jié)構(gòu),并具有抗實(shí)驗(yàn)性心律失常的作用,然而其抗心律失常機(jī)制尚不明確。
　　目的:本課題著重探討別隱品堿對家兔缺血/再灌注心肌TDR的作用及其離子機(jī)制。通過單相動(dòng)作電位(monophasic action potential MAP)記錄技術(shù)了解家兔在體TDR改變;制備兔心肌缺血再灌注模型,觀察其TDR改變、缺血再灌注心律失常和別隱品堿的保護(hù)作用;最后,通過膜片鉗技術(shù),觀察別隱品堿對三種重要復(fù)極電流瞬時(shí)外向鉀電流(T

3、ransient outward potassium current Ito)、緩慢延遲整流鉀電流(slow delayed rectifier potassium current IKs)和L-型鈣電流(L-type calcium currents ICa,L)的影響,以期從整體、組織和細(xì)胞三個(gè)層面全面了解別隱品堿的抗心律失常機(jī)制。
　　方法:
　　1.選擇12只健康家兔,通過用MAP記錄技術(shù),同步記錄在體心肌正常及減慢

4、心室率狀態(tài)下的Epi、M及Endo心肌單相動(dòng)作電位時(shí)程(monophasic action potential duration MAPD)和TDR變化。
　　2.選48只健康家兔,隨機(jī)分為4組,單純心肌缺血組(n=12)和用別隱品堿治療組(n=12)、再灌注組(n=12)和用別隱品堿治療組(n=12)。用MAP記錄技術(shù),同步記錄開胸兔在體心肌正常、急性缺血、再灌注狀態(tài)和用藥后Epi、M及Endo心肌MAPD的變化、TDR改變及缺

5、血再灌注心律失常。觀察別隱品堿對急性缺血心肌的保護(hù)作用。
　　3.采用利用二步酶解法分別獲得正常兔Epi、M及Endo單心肌細(xì)胞,利用膜片鉗技術(shù),記錄三層心肌細(xì)胞的動(dòng)作電位,并計(jì)算TDR。觀察別隱品堿干預(yù)后三層心肌細(xì)胞Ito、IKs和ICa,L電流的門控動(dòng)力學(xué)變化。
　　結(jié)果:
　　1.刺激家兔迷走神經(jīng)并將刺激基礎(chǔ)周長減慢后,正常Epi、M及Endo的MAPD呈逆頻率依賴性延長,以M細(xì)胞MAPD延長最為顯著。
　

6、　2.急性缺血時(shí),三層心肌MAPD均隨缺血時(shí)間延長而明顯縮短。M細(xì)胞的MAPD縮短較Epi和Endo小,TDR明顯增加?；謴?fù)再灌注后,Epi、M和Endo心肌MAP振幅和時(shí)程有所恢復(fù),但MAPD和TDR與缺血組相比無顯著差異。另外,出現(xiàn)了EAD、DAD和VT/VF等缺血/再灌注心律失常。應(yīng)用別隱品堿后,三層心肌MAPD較前增加,TDR明顯降低,缺血再灌注心律失常發(fā)生率明顯減少。
　　3.應(yīng)用別隱品堿后,Endo、Epi細(xì)胞的APD

7、延長較M細(xì)胞明顯;三層心肌細(xì)胞的IKs和Ito均減少,其中對M細(xì)胞的Ito作用大于對Endo、Epi的作用,而對Endo、Epi的IKs作用大于對M細(xì)胞的作用,對于Endo、M、Epi的ICa,L阻滯作用相似。
　　4.門控動(dòng)力學(xué)分析表明,別隱品堿對IKs、Ito和ICa,L抑制作用有明顯的電壓依賴性。別隱品堿使Endo、Epi的IKs滅活時(shí)間常數(shù)降低,對M細(xì)胞無影響;M細(xì)胞Ito通道激活減少,失活增加,關(guān)閉態(tài)失活速率增加;三層心

8、肌ICa,L激活和失活動(dòng)力學(xué)和窗電流均未受藥物影響。提示別隱品堿通過減少外向和內(nèi)向電流使心肌細(xì)胞復(fù)極加快,縮短APD時(shí)程,降低了TDR,避免了EAD和DAD等心律失常的產(chǎn)生。
　　結(jié)論:
　　1.健康家兔三層心肌APD存在跨室壁復(fù)極不均一性和逆頻率依賴性,以中層M細(xì)胞的APD延長最為顯著,構(gòu)成了TDR基礎(chǔ)。
　　2.當(dāng)心肌缺血再灌注時(shí),家兔TDR進(jìn)一步增大,缺血/再灌注心律失常發(fā)生率增多。
　　3.別隱品堿對缺血