TTX心臟停搏液對離體鼠心缺血再灌注心肌閏盤蛋白的影響.pdf

1、目的：研究Na+通道阻滯劑河豚毒素(TTX)心臟停搏液對離體鼠心缺血再灌注心肌閏盤蛋白的影響。 方法：20只Wistar大鼠隨機(jī)均分入TTX組(實驗組)和STH-2組(對照組)。建立離體心臟Langendorff和Neely灌注模型：待搏動穩(wěn)定后持續(xù)灌注30 min，兩組分別用TTX和St.Thomas-2心臟停搏液停搏并4℃保存60 min；然后恢復(fù)灌注60 min，取左心室肌備檢。采用免疫組化(IH)和蛋白質(zhì)印跡(WB)檢測

2、缺血再灌注后心肌閏盤蛋白的分布情況及表達(dá)量的變化，包括橋粒相關(guān)蛋白(Dsp和結(jié)蛋白)、縫隙連接相關(guān)蛋白(Cx43)、粘合連接相關(guān)蛋白(N型鈣粘著糖蛋白和α肌動蛋白)等。同時通過觀察心臟的停搏和復(fù)搏速率，各組心臟停搏前后的血流動力學(xué)參數(shù)心率(HR)、冠狀動脈流量(CAF)、左心室收縮末期壓(LVESP)、左心室最大壓力變化速率(±dp/dt)等，了解心功能的變化。 結(jié)果：橋粒相關(guān)蛋白的IH檢測顯示TTX組的Dsp和結(jié)蛋白較STH-

3、2組分布整齊規(guī)則；Dsp和結(jié)蛋白表達(dá)量分別為0.0547±0.0057和0.0513±0.0003，明顯高于STH-2組的0.0451±0.0084和0.03434±0.0003(P＜0.01)。WB檢測顯示TTX組的Dsp和結(jié)蛋白表達(dá)量分別為1.1773±0.0075和1.1422±0.0362，明顯高于STH-2組的0.7997±0.0080和0.7648±0.0215(P＜0.01)。縫隙連接相關(guān)蛋白的IH檢測顯示TTX組的Cx4

4、3分布情況較STH-2組規(guī)則；TTX組的Cx43表達(dá)量為0.0229±0.0014，明顯高于STH-2組的0.0166±0.0008(P＜0.01)。WB檢測顯示TTX組的Cx43表達(dá)量為0.9829±0.0079，明顯高于STH-2組的0.5047±0.0067(P＜0.01)。 粘合連接相關(guān)蛋白的IH檢測顯示與STH-2組比較，TTX組的N型鈣粘著糖蛋白和α肌動蛋白分布較規(guī)則整齊；TTX組的N型鈣粘著糖蛋白和α肌動蛋白表達(dá)量

5、分別為0.0677±0.0003和0.0738±0.0005，明顯高于STH-2組的0.0243±0.0003和0.0305±0.0002(P＜0.01)。WB檢測顯示TTX組的α肌動蛋白表達(dá)量為1.0178±0.0158，明顯高于STH-2組的0.3828±0.0137(P＜0.01)。與STH-2組比較，TTX組的停搏和復(fù)搏速率均明顯縮短(P＜0.05)；缺血前，兩組的血流動力學(xué)參數(shù)無差異；再灌注期間，TTX組的血流動力學(xué)參數(shù)的恢復(fù)