大鼠胎腦放射狀膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶.pdf

1、證實端腦背側(cè)腦室區(qū)放射狀膠質(zhì)細(xì)胞是否表達(dá)ChAT(乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶)以了解其是否產(chǎn)生膽堿能神經(jīng)元。
　　本實驗采用免疫組織化學(xué)技術(shù)和電鏡技術(shù)觀察了大鼠端腦背側(cè)產(chǎn)生的皮質(zhì)錐體神經(jīng)元的放射狀膠質(zhì)細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞分裂以及 ChAT(乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶)的表達(dá)。實驗首先采用Vimentin(波形蛋白)對端腦培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行免疫組化染色。其結(jié)果表明為陽性表達(dá)。通過 E14大鼠胚胎端腦細(xì)胞進(jìn)行體外原代培養(yǎng)觀察、培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行波形蛋白和乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶雙重?zé)晒?/p>

2、免疫細(xì)胞化學(xué)染色以在體外實驗中確定放射狀膠質(zhì)細(xì)胞是否表達(dá)乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶；并通過重疊同一視野內(nèi)的熒光單染的圖片來精確的體現(xiàn)放射狀膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶的位置。
　　結(jié)果顯示E14大鼠胚胎端腦細(xì)胞經(jīng)血清培養(yǎng)聚集成團的細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)有呈Vimentin/ChAT免疫化學(xué)雙染陽性表達(dá)。細(xì)胞聚集成團，細(xì)胞團內(nèi)部雙染陽性細(xì)胞較多，細(xì)胞團間可見伸出的彼此聯(lián)系的突起，細(xì)胞沿突起在細(xì)胞團之間遷移，突起中也有Vimentin/ChAT免疫化學(xué)雙染陽性

3、表達(dá)。此結(jié)果在體外實驗方面證實了E14大鼠端腦內(nèi)的放射狀膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶。表明放射狀膠質(zhì)細(xì)胞具有神經(jīng)干細(xì)胞性質(zhì)，它不斷地進(jìn)行不對稱分裂，產(chǎn)生膽堿能表型的成神經(jīng)細(xì)胞，即膽堿能前體細(xì)胞。放射狀膠質(zhì)細(xì)胞在神經(jīng)元發(fā)生期進(jìn)行不對稱分裂的同時已經(jīng)決定了它所產(chǎn)生神經(jīng)細(xì)胞的表型，合成神經(jīng)遞質(zhì)乙酰膽堿。
　　結(jié)果提示：（1）放射狀膠質(zhì)細(xì)胞可以產(chǎn)生膽堿能神經(jīng)元；（2）放射狀膠質(zhì)細(xì)胞可能依據(jù)其產(chǎn)生不同神經(jīng)元的類型分為不同亞群；（3）放射狀膠質(zhì)