重組人血管內皮抑制素聯合化療藥物治療乳腺癌的動物實驗研究.pdf

1、目的： 通過動物實驗研究重組人血管內皮抑制素(恩度)聯合順鉑對人乳腺癌細胞系MCF-7裸鼠腫瘤生長的抑制作用，觀察恩度治療乳腺癌裸鼠皮下種植瘤的療效，為恩度在治療乳腺癌中應用提供理論依據。 方法： 建立裸鼠MCF-7乳腺癌模型分組給藥，觀察腫瘤生長狀況，給藥20天后取腫瘤和肺臟肝臟，HE染色檢測腫瘤臟器轉移情況；反轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)和免疫印跡(weatern-bloting)分別在基因和蛋白水平檢測

2、瘤組織VEGF的表達情況；流式細胞儀檢測組織內腫瘤細胞凋亡狀況。 結果： 1．40只裸鼠全部成瘤，成瘤率達100％。腫瘤早期為橢圓形，表面光滑，后期呈不規(guī)則形，有的表面可見結節(jié)呈菜花樣，富含血管。 2．順鉑聯合恩度治療組裸鼠腫瘤體積較順鉑組、恩度組和生理鹽水組明顯縮小，有顯著性差異(P<0.05)，順鉑組較恩度組腫瘤體積也明顯縮小，有顯著性差異(P<0.05)。各組間抑瘤率也有顯著性差異(P<0.05)。順鉑聯合

3、恩度組、陽性對照組、恩度治療組、陰性對照組腫瘤體積95％CI分別為(0.6506-0.7113)cm3、 (1.1207-1.3565)cm3、(1.5549-2.1591)cm3、(3.0017-3.7544)cm3：用藥組抑瘤率分別為92.1％、57.3％、36.5％。 3．各組肺轉移率分別為：0.5％、20％、90％，各組間均有統(tǒng)計學差異(P<0.05)。 4．一般性觀察實驗前各組裸鼠一般狀態(tài)良好；實驗結束時40只

4、裸鼠全部存活。通過食物每日剩余觀察發(fā)現，陰性對照組裸鼠進食明顯日漸減少；陽性對照組裸鼠消瘦嚴重，治療組裸鼠覓食、飲水、活動等狀況良好，未發(fā)現腹瀉、淤血等現象。 5．反轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)檢測瘤組織中VEGF表達水平：通過在凝膠成像系統(tǒng)下觀察可見對照組和藥物組均有VEGF、GAPDH的表達，經Lab-work軟件分析聯合用藥組VEGF表達較弱，陰性對照組表達較強。方差分析各組間均有統(tǒng)計學差異(P<0.04)。 6．免疫

5、印跡(weatern-bloting)蛋白水平檢測瘤組織VEGF的表達情況，ECL(enhanced chemi luminescence)顯色觀察結果經Lab-work軟件分析聯合用藥組VEGF表達較弱，陰性對照組表達較強，分析各組間蛋白表達均有統(tǒng)計學差異(P<0.04)。 7．流式細胞儀檢測組織內腫瘤細胞凋亡狀況，聯合用藥組的細胞凋亡率均數為31.6％，高于陰性對照組15.7％，通過方差分析各組存在顯著差異(P<0.01)。