不同處理對豬前頂體蛋白活性及降解的影響.pdf

1、本試驗的主要目的是研究豬精子在4℃下不同平衡時間（20、40、60、80、100min），為豬精液冷凍篩選最佳的平衡時間；向冷凍稀釋液中分別添加2％、4%、6%、8%濃度的甘油，為冷凍保護(hù)劑篩選最佳甘油濃度。評估不同處理對精子頂體酵素活性的影響。向精液中分別添加咖啡因與維生素E，篩選出最佳冷凍保護(hù)劑添加物，進(jìn)一步優(yōu)化凍融豬精子的質(zhì)量。利用SDS-PAGE方法，分析凍融豬精子前頂體蛋白的轉(zhuǎn)化過程。結(jié)果表明：
　　1、4℃下平衡的豬精

2、子，以冷卻平衡60min的豬精子質(zhì)量明顯高于其它溫度平衡的平衡時間（P<0.05），精子質(zhì)量此時最高，精子活為33.75％，頂體完整率為34.25％，低滲膨脹率為31.50％。而且，各個處理組精子質(zhì)量均明顯高于對照組，因此可以看出在4℃條件下平衡對精子冷凍過程非常重要。甘油2%和4%濃度處理組中，凍融豬精子的質(zhì)量明顯高于對照組和其它濃度組（P<0.05），可見甘油2%和4%的濃度處理在凍融過程中能夠更好的保護(hù)精子，提高精子質(zhì)量，從而提高

3、凍融精子的實際利用價值。
　　2、鮮精、稀釋精液（l:1）和液相精液（17℃）的精子頂體酵素活性分別是5.27,4.28和4.41(mUI/106）。精子在37℃培養(yǎng)條件下精子頂體酵素的活性有上升的趨勢，建議最佳的受精溫度是25℃～37℃。
　　3、分別將以5mg/mL咖啡因和200mg/ml維生素E作為冷凍保護(hù)劑的凍融精子與新鮮精子進(jìn)行SDS-PAGE分析比較。添加咖啡因和維生素E作為冷凍保護(hù)劑的凍融精子比無咖啡因的凍融精