同型半胱氨酸血癥所致大鼠仔鼠先天性心臟病與SRF基因表達(dá)的相關(guān)性研究.pdf

1、目的： 通過建立同型半胱氨酸（Homocysteine，Hcy）誘導(dǎo)的仔鼠先天性心臟病（Congenital heart defect，CHD）模型，觀察仔鼠心臟畸形情況，探討不同劑量的Hcy對(duì)CHD仔鼠心肌病理損害程度與血清反應(yīng)因子（Serum response factor， SRF）表達(dá)水平的關(guān)系，進(jìn)一步探討Hcy導(dǎo)致CHD的分子機(jī)制。 方法： 40只S-D孕鼠隨機(jī)分為四組：低劑量Hcy建模組（A組）、高劑

2、量Hcy建模組（B組），高劑量Hcy+FA+VitB12干預(yù)組（C組），對(duì)照組（D組），每組各10只。大鼠妊娠第7～17天腹腔注射不同劑量的Hcy：A組1％ Hcy0.1ml/10g.Wt/d、B組2％ Hcy0.1ml/10g，Wt/d、C組2％Hcy0.1ml/10g.Wt/d、D組用生理鹽水0.1ml/10g.Wt/d注射，C組自確定妊娠起至分娩，按FA0.05mg/10g.Wt/d+VitB121mg/10g.Wt/d飲水喂養(yǎng)。

3、 分娩當(dāng)天解剖仔鼠，體視顯微鏡觀察仔鼠心臟畸形情況。 A、B、C三組選取CHD仔鼠心臟各2例，D組選取非CHD心臟2例，利用光鏡和透射電鏡觀察仔鼠心肌形態(tài)學(xué)的病理改變；選取A、B、C三組CHD仔鼠心臟9例、10例、8例，A、B、C三組非CHD仔鼠心臟及D組非CHD仔鼠心臟各10例，提取RNA應(yīng)用Real time PCR檢測SRF mRNA在仔鼠心臟的表達(dá)情況。 選取A、B、C三組CHD仔鼠心臟各2例，非CHD仔

4、鼠心臟及D組非CHD仔鼠心臟各5例，利用免疫組化法檢測各組SRF蛋白陽性表達(dá)的平均光密度。 結(jié)果: 1.A、B、C、D的平均產(chǎn)仔數(shù)分別是12.1只、9.0只、11.6只及13.6只，A、B、C組平均產(chǎn)仔數(shù)均低于D組，p值均<0.01，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；A、B、C三組之間兩兩比較，p值均<0.01，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，平均產(chǎn)仔數(shù)A組>C組>B組。 2.A、B、C、D組仔鼠心臟畸形率分別是9.17％、13.50％、8.

5、77％、0.74％，A、B、C組仔鼠心臟畸形率均高于D組，p值均<0.01；A、B、C三組之間兩兩比較，p值均>0.05，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 3.A、B、C、D四組仔鼠心肌組織的細(xì)胞和亞細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察：與D組相比，A、B、C三組CHD仔鼠心肌組織均表現(xiàn)出不同程度的凋亡改變，且損傷程度B組>A組，B組>C組。 4.SRF mRNA在A、B、C、D四組仔鼠心臟表達(dá)的比較：A、B、C三組CHD仔鼠心臟與本組內(nèi)非CHD及D組非C

6、HD仔鼠心臟表達(dá)比較，p值均<0.01，SRF mRNA在CHD仔鼠心臟中的表達(dá)低于非CHD仔鼠；A、B、C三組CHD仔鼠心臟中的表達(dá)比較：A組與B組、B組與C組比較，p值均<0.001，A組與C組比較，p值>0.05；A、B、C、D四組非CHD仔鼠心臟組織中的表達(dá)，p值均>0.05； SRF mRNA表達(dá)水平與Hcy劑量呈負(fù)相關(guān)，p<0.01。 5.SRF蛋白在A、B、C、D四組仔鼠心臟表達(dá)的比較：A、B、C三組CHD仔鼠心臟

7、與本組內(nèi)非CHD及D組非CHD仔鼠心臟的表達(dá)相比，p值均<0.01，SRF蛋白在CHD仔鼠心臟中的表達(dá)低于非CHD仔鼠；A、B、C三組CHD仔鼠心臟中的表達(dá)比較：A組與B組、B組與C組比較，p值均<0.001，A組與C組比較，p>0.05；A、B、C、D四組非CHD仔鼠心臟組織中的表達(dá)，p值均>0.05； Hcy劑量與SRF蛋白表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)，p<0.01。 結(jié)論: 1、Hcy對(duì)大鼠仔鼠具有胚胎毒性和細(xì)胞毒性。