重復(fù)經(jīng)顱磁刺激對(duì)神經(jīng)源性疼痛大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞增殖與nNOS表達(dá)的影響.pdf

1、目的:觀察不同頻率重復(fù)經(jīng)顱磁刺激(repetitive transcranial magnetic stimulation,rTMS)對(duì)神經(jīng)源性疼痛大鼠的行為學(xué)影響,并檢測(cè)損傷側(cè)背根神經(jīng)節(jié)(dorsal root ganglion,DRG)內(nèi)神經(jīng)型一氧化氮合酶(nNOS)的表達(dá)以及損傷側(cè)脊髓后角中星形膠質(zhì)細(xì)胞的激活和增殖情況,從而觀察rTMS對(duì)神經(jīng)源性疼痛的作用,并進(jìn)一步探討其作用機(jī)制。
　　方法:將32只雄性Sprague-Da

2、wley大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、假治療組、1Hz治療組及20Hz治療組共4組,每組8只,采用大鼠坐骨神經(jīng)慢性壓迫性損傷(chronic constriction injury of sciatic nerve,CCI)造成大鼠左側(cè)下肢出現(xiàn)周圍神經(jīng)源性疼痛,在術(shù)后第3天采用不同治療參數(shù)的rTMS刺激大鼠右側(cè)運(yùn)動(dòng)皮質(zhì)(M1區(qū)),連續(xù)10天,每天1次,治療前后進(jìn)行疼痛行為學(xué)評(píng)分,治療結(jié)束后取左側(cè)L4-L6DRG,采用Western Blot檢測(cè)

3、其中nNOS蛋白表達(dá);取左側(cè)L4-L6脊髓節(jié)段進(jìn)行免疫熒光雙標(biāo)(GFAP/BrdU)分析,觀察星形膠質(zhì)細(xì)胞增殖活化情況。
　　結(jié)果:自發(fā)疼痛行為評(píng)分:造模后3天,假治療組、20Hz治療組與假手術(shù)組比較評(píng)分顯著增高(P<0.05),rTMS治療后,20Hz組與假治療組比較得分顯著降低(P<0.05),提示20Hz組自發(fā)疼痛減輕。激惹疼痛行為評(píng)分:造模后3天,假治療組、1Hz組及20Hz組與假手術(shù)組比較評(píng)分顯著增高(P<0.05),提

4、示激惹痛顯著;rTMS治療后,20Hz組與假治療組、1Hz組比較得分降低(P<0.05),提示20Hz組激惹疼痛緩解。采用Western Blot分析nNOS蛋白表達(dá),在rTMS治療后,20Hz組nNOS蛋白表達(dá)與1Hz組和假治療組比較顯著減少(P<0.01)。假手術(shù)組損傷側(cè)L4-6脊髓后角內(nèi)GFAP只有少量表達(dá),與BrdU共標(biāo)極少;假治療組與1Hz治療組損傷側(cè)L4-6脊髓后角內(nèi)GFAP染色增強(qiáng),與BrdU共標(biāo)較多;20Hz治療組在rT

5、MS治療后損傷側(cè)L4-6脊髓后角內(nèi)GFAP染色強(qiáng)度降低,與BrdU共標(biāo)減少。20Hz組與假治療組、1Hz組損傷側(cè)L4-6脊髓后角內(nèi)GFAP/BrdU共標(biāo)細(xì)胞計(jì)數(shù)相比較,顯著減少(P<0.05)。相關(guān)分析顯示:20Hz組大鼠自發(fā)疼痛和激惹疼痛改善程度與疼痛側(cè)相應(yīng)水平DRG內(nèi)nNOS表達(dá)和脊髓背角中GFAP/BrdU共標(biāo)細(xì)胞數(shù)呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)。
　　結(jié)論:坐骨神經(jīng)損傷導(dǎo)致的神經(jīng)源性疼痛可誘導(dǎo)損傷側(cè)DRG內(nèi)nNOS蛋白表達(dá)增加及