重復(fù)經(jīng)顱磁刺激治療難治性癲癇的作用及對(duì)腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子和神經(jīng)肽Y表達(dá)的影響.pdf

1、一、低頻重復(fù)經(jīng)顱磁刺激治療難治性癲癇大鼠模型的作用及對(duì)腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子和神經(jīng)肽Y表達(dá)的影響
　　 目的:觀察低頻重復(fù)經(jīng)顱磁刺激(rTMS)對(duì)難治性癲癇(RE)大鼠模型的治療作用及對(duì)腦內(nèi)腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)及神經(jīng)肽Y(NPY)表達(dá)的影響,探討其可能的作用機(jī)制。
　　 方法：54只雄性Wistar成年大鼠隨機(jī)分為海仁酸(KA)真性刺激干預(yù)組(KA+rTMS)、假性刺激模型組(KA+s-rTMS)和生理鹽水對(duì)照組(

2、NS+s-rTMS),每組18只。采用立體定向海馬CA3區(qū)注射KA制備大鼠顳葉RE模型,對(duì)照組于同部位注射等量NS。真性刺激組連續(xù)接受rTMS治療兩周(治療5天,間隔2天),磁刺激參數(shù)設(shè)定為0.5Hz,0.8T,600脈沖。分別于治療前后觀察其行為學(xué)變化,記錄腦電圖(EEG),應(yīng)用MATLAB7.0軟件對(duì)腦電信號(hào)進(jìn)行處理,比較各組之間不同時(shí)間點(diǎn)各頻帶相對(duì)功率值和尖波數(shù)量。分別于術(shù)后24小時(shí)(h)、1周(w)和3周(w)取6只斷頭取腦。通

3、過(guò)免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)腦組織海馬區(qū)BDNF和NPY的表達(dá),用陽(yáng)性神經(jīng)元計(jì)數(shù)法及借助圖像分析軟件ImagPro-plus6.0測(cè)陽(yáng)性區(qū)域積分光密度值進(jìn)行半定量分析。
　　 結(jié)果：
　　 1.經(jīng)低頻rTMS治療后,癲癇大鼠EEG的尖波數(shù)量明顯減少,各頻帶相對(duì)功率值向腦功能優(yōu)化的方向轉(zhuǎn)化:KA+rTMS組在術(shù)后1w和3w時(shí)均較KA+s-rTMS組的EEGT3及T4導(dǎo)聯(lián)上尖波數(shù)量顯著減少,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。KA+s-rTMS組

4、和KA+rTMS組EEGT4導(dǎo)聯(lián)上尖波數(shù)量隨時(shí)間增多,并且在術(shù)后3w時(shí)與EEGT3導(dǎo)聯(lián)上尖波數(shù)量相近。KA+rTMS組較KA+s-rTMS組在同一時(shí)間點(diǎn)上慢波6頻帶相對(duì)功率值降低,而α頻帶相對(duì)功率值顯著升高；尤在EEGT3導(dǎo)聯(lián)上3W時(shí)顯著。
　　 2.BDNF免疫組化:KA+rTMS組較KA+s-rTMS組在癲癇大鼠術(shù)后24h、1w及3w時(shí)腦組織海馬區(qū)BDNF免疫反應(yīng)陽(yáng)性神經(jīng)元計(jì)數(shù)明顯減少,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 3

5、.酪氨酸受體激酶B(TrkB)免疫組化:KA+rTMS組較KA+s-rTMS組在癲癇大鼠術(shù)后24h、1w及3w時(shí)腦組織海馬區(qū)TrkB免疫反應(yīng)陽(yáng)性神經(jīng)元計(jì)數(shù)減少,尤以1w及3w時(shí)顯著。
　　 4.NPY免疫組化:KA+rTMS組較KA+s-rTMS組在癲癇大鼠術(shù)后24h、1w及3w時(shí)腦組織海馬區(qū)NPY免疫反應(yīng)陽(yáng)性神經(jīng)元計(jì)數(shù)明顯減少,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)論：
　　 1.低頻rTMS能降低RE大鼠模型EEG的

6、尖波數(shù)量并改善其背景波；能夠保護(hù)海馬區(qū)神經(jīng)元,抑制膠質(zhì)細(xì)胞增生,減輕海馬硬化程度。
　　 2.低頻rTMS可明顯減少海馬各區(qū)BDNF、TrkB及NPY陽(yáng)性細(xì)胞。BDNF、TrkB及NPY表達(dá)與癲癇的發(fā)生、發(fā)展密切相連。
　　 3.RE大鼠模型非注藥測(cè)(右側(cè)海馬)隨時(shí)間變化其EEG相應(yīng)導(dǎo)聯(lián)(T4)上尖波數(shù)量增多,并且背景節(jié)律差；一側(cè)海馬癇性放電隨時(shí)間進(jìn)展可能會(huì)影響到對(duì)側(cè)。
　　 4.基于MATLAB平臺(tái)對(duì)腦電信號(hào)進(jìn)

7、行偽差處理,并通過(guò)設(shè)定波形的時(shí)限、波幅和斜度等閾值,對(duì)其中的癲癇特征波(尖波和棘波)進(jìn)行識(shí)別,可以快速準(zhǔn)確的進(jìn)行直觀腦電信號(hào)分析,較人工目測(cè)識(shí)別更為客觀,省時(shí)和方便。
　　 二、低頻重復(fù)經(jīng)顱磁刺激治療難治性癲癇的臨床探索
　　 目的:觀察低頻及閾下強(qiáng)度的rTMS治療RE的療效。
　　 方法：對(duì)12例難治性局限性癲癇患者給予刺激強(qiáng)度為運(yùn)動(dòng)閾值的90％、頻率為0.5Hz、起始脈沖量600的磁刺激治療,1天1次,5天為

8、一療程。12例中有5例接受了第二療程的治療。分析并評(píng)價(jià)治療前后癲癇發(fā)作頻率、發(fā)作天數(shù)及發(fā)作潛伏期；采集治療前后腦電信號(hào),應(yīng)用MATLAB7.0軟件進(jìn)行EEG各頻帶相對(duì)功率值(％)和尖波發(fā)放數(shù)量的分析。
　　 結(jié)果:12例患者經(jīng)低頻rTMS首次治療后,癲癇發(fā)作頻率及發(fā)作天數(shù)均顯著減少,其中8例發(fā)作潛伏期延長(zhǎng)。EEG-δ頻帶相對(duì)功率值(δ％)顯著降低、β頻帶相對(duì)功率值(p％)增加,尤以α頻帶相對(duì)功率值(α％)增加更為顯著；EEG尖波