辛伐他汀抑制心肌梗死大鼠心室重構(gòu)及其與TGF-β1信號通路的相關(guān)性研究.pdf

1、第一部分、辛伐他汀對MI后大鼠心室重構(gòu)的保護作用
　　 目的：
　　 研究辛伐他汀對心肌梗死（myocardial infarction，MI）后大鼠心室重構(gòu)（ventricular remodeling，VR）和左心室功能的影響。
　　 方法：
　　 通過結(jié)扎SD大鼠左冠狀動脈前降支建立MI模型，24小時后存活大鼠隨機分成心肌梗死組（MI，n=9）、辛伐他汀（simvastatin，Sim）10mg組（

2、10mg.kg-1.d-1，Sim1，n=8）、20mg組（20mg.kg-1.d-1，Sim2，n=10）和40mg組（40mg.kg-1.d-1，Sim4，n=9），另設(shè)假手術(shù)組（Sham，n=10）。4周后觀察各組血脂水平、血流動力學(xué)指標(biāo)、左心室重量及左心室重量指數(shù)；HE染色觀察各組心肌組織結(jié)構(gòu)的變化和心肌細胞橫切面積（cardiomyocytecross-sectional area，CSA）。
　　 結(jié)果：
　　

3、 （1）各組大鼠血脂水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；（2）與Sham對照組比較，MI后血流動力學(xué)嚴重受損（P<0.05）。與MI組比較，Sim各組血流動力學(xué)指標(biāo)明顯改善（P<0.05），而且Sim2組和Sim4組較Sim1組血流動力學(xué)改善更為顯著，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），而Sim2組和Sim4組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；（3）與Sham對照組比較，MI后左心室重量（LVW）和左心室重量指數(shù)（LVWI）顯著升高

4、，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。與MI組比較，Sim各組LVW和LVWI明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），而且Sim2組和Sim4組較Sim1組降低更為顯著，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），而Sim2組和Sim4組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。（4）在HE染色切片下觀察發(fā)現(xiàn)，與Sham對照組比較，各手術(shù)組心肌梗死區(qū)變薄，結(jié)構(gòu)紊亂，纖維化增加，大量炎性細胞浸潤，非梗死區(qū)殘存心肌細胞代償性肥大；Sim各組心肌組織無論梗

5、死區(qū)或非梗死區(qū)結(jié)構(gòu)明顯改善。（5）與Sham對照組比較，MI后CSA明顯增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；與MI組比較，Sim各組CSA明顯減少，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），而且Sim2組和Sim4組較Sim1組減少更為顯著，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），而Sim2組和Sim4組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。
　　 結(jié)論：
　　 Sim能抑制MI后左心室重構(gòu)，改善血流動力學(xué)；在一定范圍內(nèi)增加Sim劑

6、量可能增強其療效（本實驗在20mg.kg-1·d-1以內(nèi)增加Sim劑量可能增強其療效）。
　　 第二部分、辛伐他汀對MI大鼠心肌膠原重構(gòu)的影響
　　 目的：
　　 探索大鼠MI修復(fù)過程中，心肌膠原重構(gòu)及其可能機制，觀察Sim對其的影響。
　　 方法：
　　 建立大鼠MI模型，Sim或生理鹽水干預(yù)4周，取材石蠟切片，采用苦味酸-天狼猩紅膠原染色技術(shù)分析左心室梗死區(qū)和非梗死區(qū)Ⅰ、Ⅲ型膠原容積分數(shù)（th

7、e collagen volume fraction，CVF）及Ⅰ/Ⅲ型CVF比值；免疫組織化學(xué)染色分析非梗死區(qū)基質(zhì)金屬蛋白酶-2（matrixmetalloproteinase-2，MMP-2）的表達。
　　 結(jié)果：
　　 （1）與Sham對照組比較，MI組及Sim各組梗死區(qū)Ⅰ型、Ⅲ型CVF及Ⅰ/Ⅲ膠原比值均增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；而MI組、Sim1、Sim2及Sim4組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05

8、）。（2）與Sham對照組比較，MI各組非梗死區(qū)Ⅰ型、Ⅲ型CVF及Ⅰ/Ⅲ膠原比值均增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；與MI組比較，Sim組各組非梗死區(qū)Ⅰ型、Ⅲ型CVF及Ⅰ/Ⅲ膠原比值下降（但仍高于Sham組），差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），而Sim2組和Sim4組較Sim1組下降更為顯著，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），而Sim2組和Sim4組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。（3）與Sham組和Sim組比較，MI組MMP

9、-2表達水平顯著升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），Sim1、Sim2和Sim4組較Sham組升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），而Sim三個劑量組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。
　　 結(jié)論：
　　 MI后修復(fù)過程中心肌發(fā)生了顯著的纖維化重構(gòu)，Sim能有效抑制MI后心肌纖維化，改善膠原比例失調(diào)，其機制可能與下調(diào)MMP-2的表達有關(guān)。
　　 第三部分、辛伐他汀對MI大鼠心肌TGF-β1信號系統(tǒng)的影響<

10、br>　　 目的：
　　 探討Sim對大鼠MI后心室重構(gòu)心肌TGF-β1信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的影響。
　　 方法：
　　 建立大鼠MI模型，Sim或生理鹽水干預(yù)4周，取非梗死區(qū)心肌組織，采用逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)（reverse transcription polymerase chainreaction，RT-PCR）技術(shù)檢測轉(zhuǎn)化生長因子β1（transforming growth factorbeta1，TGF-β1）、S

11、mad3、Smad7和TGF-β活化激酶1（TGF-beta activatedkinase1，TAK1）在基因轉(zhuǎn)錄水平的表達；采用蛋白質(zhì)印跡（Western blot）技術(shù)檢測TGF-β1，Smad3和TAK1在蛋白質(zhì)翻譯水平的表達；采用免疫組織化學(xué)染色檢測非梗死區(qū)Smad7蛋白表達。
　　 結(jié)果：
　　 （1）MI后TGF-β1，Smad3和TAK1無論在mRNA或蛋白水平表達均較Sham組明顯升高，差異具有統(tǒng)計學(xué)意

12、義（P<0.05）；與MI組比較，Sim各組TGF-β1，Smad3和TAK1的mRNA和蛋白表達均有明顯下調(diào)，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），而Sim2組和Sim4組的前述指標(biāo)與Sim1組差異有統(tǒng)計學(xué)（P<0.05），但Sim2組與Sim4組間差異無統(tǒng)計學(xué)（P>0.05）；（2）與Sham組和Sim組比較，MI組Smad7表達水平顯著降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），Sham、Sim1、Sim2和Sim4組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義