低砷染毒對(duì)小鼠肝臟砷代謝酶基因轉(zhuǎn)錄水平和脂質(zhì)過(guò)氧化損傷的影響.pdf

1、目的： 1.動(dòng)態(tài)觀察低劑量砷染毒小鼠肝臟砷代謝相關(guān)酶基因表達(dá)水平的變化；2.動(dòng)態(tài)觀察低劑量砷染毒小鼠致肝臟損傷及脂質(zhì)過(guò)氧化情況。 方法： 將96只健康雄性KM小鼠隨機(jī)分成4組,實(shí)驗(yàn)受試物為亞砷酸鈉,通過(guò)飲水途徑染毒。染毒組分為50μg/L、500μg/L、5000μg/L三個(gè)劑量,并且同時(shí)設(shè)陰性對(duì)照組,每個(gè)劑量組分三個(gè)染毒時(shí)間段,分別為4周、6周和8周,在各自的染毒時(shí)間結(jié)束后,處死小鼠。觀察指標(biāo)為：飲水量、飼料消

2、耗量、體重、主要的臟器系數(shù)；原子熒光吸收光譜法測(cè)血、肝臟和腎臟的總砷含量；肝臟脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物丙二醛(MDA)、肝臟過(guò)氧化物岐化酶(SOD)活性、肝臟谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)活性以及用RT-PCR法測(cè)肝臟砷代謝相關(guān)酶(PNP、GSTO、AS3MT)的基因表達(dá)水平。采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析。 結(jié)果： 1.一般毒性：染毒組和對(duì)照組相比,飲水量、飼料消耗量都無(wú)明顯差異(P＞0.05);體重在低、中劑量染

3、毒4周明顯增高,高劑量組8周則顯著降低。肝臟和腎臟系數(shù)均是隨染毒時(shí)間和染毒劑量的增加出現(xiàn)先增高后降低的現(xiàn)象,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。脾臟和心臟系數(shù)均隨染毒時(shí)間和染毒劑量的增加而增加(P＜0.05),腦系數(shù)無(wú)明顯變化(P＞0.05),肺臟系數(shù)在中劑量有明顯增高(P＜0.05),低、高劑量則無(wú)明顯變化(P＞0.05)。 2.小鼠體內(nèi)砷含量變化：血砷、肝砷、腎砷含量隨著染毒時(shí)間和染毒劑量的增加而逐漸增高,但是在短時(shí)間染毒差異沒(méi)有

4、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05),隨著時(shí)間延長(zhǎng),在低、中、高劑量組砷含量逐漸增高,且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。砷主要蓄積在肝臟,其次是血液,腎臟碑含量遠(yuǎn)低于肝和血。三者的變化趨勢(shì)一致。 3.小鼠肝臟脂質(zhì)過(guò)氧化:MDA含量隨染毒時(shí)間和染毒劑量的增加而增高,有顯著性差異(P＜0.05);SOD活性和GSH-Px活性則是隨著染毒時(shí)間和染毒劑量的增加出現(xiàn)先增高后降低的現(xiàn)象,其增高均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。GSH-Px活性降低與對(duì)照組

5、之間有顯著性差異(P＜0.05),而SOD活性降低與對(duì)照組相比無(wú)明顯差異(P＞0.05)。 4.小鼠肝臟砷代謝酶基因表達(dá)水平:PNP基因表達(dá)水平隨染毒時(shí)間和染毒劑量的增加沒(méi)有明顯的變化(P＞0.05);AS3MT和GSTO基因表達(dá)水平隨著染毒時(shí)間的增加沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；染毒組與同期對(duì)照組相比,隨劑量增加,AS3MT和GSTO基因表達(dá)量增高,在中、高劑量組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。 5.脂質(zhì)過(guò)氧化和代謝酶基因表達(dá)的相關(guān)性

6、分析:MDA與AS3MT和GSTO呈正相關(guān),相關(guān)系數(shù)分別為0.510和0.443。GSH-Px活性則與AS3MT和GSTO呈負(fù)相關(guān),相關(guān)系數(shù)分別為-0.558和-0.408。MDA和GSH-Px與PNP均無(wú)相關(guān)性,SOD活性與PNP、AS3MT、GSTO均無(wú)相關(guān)性。 結(jié)論： 1.低砷可以誘導(dǎo)小鼠肝腎的抗氧化損傷系統(tǒng)出現(xiàn)適應(yīng)性的增高,隨著劑量和作用時(shí)間增加最終會(huì)造成小鼠的氧化損傷。 2.低砷可以誘導(dǎo)AS3MT、GS